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技術(shù)文章

合成/代謝elisa試劑盒檢測(cè)程序

閱讀:190發(fā)布時(shí)間:2017-3-6

合成/代謝elisa試劑盒種屬有:人、牛、鼠、豬、兔。
  
  產(chǎn)品類型:ELISA試劑盒
  
  蛋白質(zhì)生物過程:合成/代謝
  
  蛋白質(zhì)生物過程:甲狀腺激素的生物合成
  
  檢測(cè)時(shí)間:1-5H
  
  樣品體積:50-100ul
  
  檢測(cè)wavelengt:450nm處
  
  合成/代謝elisa試劑盒在實(shí)驗(yàn)前:
  
  在使用前,將所有試劑和樣品室溫。再次離心樣品解凍后測(cè)定前。據(jù)建議,所有樣品和標(biāo)準(zhǔn)來測(cè)定一式兩份。
  
  1。準(zhǔn)備好所有試劑,工作標(biāo)準(zhǔn)和樣品在前面的章節(jié)中。
  
  2。請(qǐng)確定井?dāng)?shù)的使用,并把任何剩余的井和入袋干燥劑,密封保鮮袋,將未使用的井在4°C的含量布局表
  
  。每孔加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)和樣品。封面用膠粘帶提供。孵育2小時(shí),在37℃下一盤布局記錄標(biāo)準(zhǔn)和樣品檢測(cè)。
  
  4。每孔中取出的液體,不洗。
  
  5。向每孔中加入100μl*抗體(1倍)。蓋上一個(gè)新的膠粘帶。孵育1小時(shí),在37℃下(*抗體(1X)可能會(huì)出現(xiàn)混濁。預(yù)熱至室溫,輕輕混勻,直到出現(xiàn)均勻解決方案。)
  
  6。吸液的各孔和洗滌,共洗滌三次重復(fù)該過程兩次。洗凈,每孔填充洗滌緩沖液(200μL)使用噴瓶,多道移液器,歧管器,或autowasher,和,靜置2分鐘,*清除液體的每一步是*的良好的性能。zui后一次洗滌后,清除任何剩余洗滌緩沖液的吸ordecanting。倒置板和涂抹對(duì)干凈的紙巾。
  
  7。向每孔中加入100μl的HRP-抗*蛋白(1×)。量的微量滴定板,用一個(gè)新的粘接劑條。溫育1小時(shí),在37℃下
  
  8。重復(fù)的愿望/洗滌過??程中,在步驟6的5倍。
  
  9。將90μlTMB底物添加到每個(gè)孔中。孵育15-30分鐘,在37℃下避光
  
  10。一站式解決方案,每孔加入底物,輕輕晃動(dòng)酶標(biāo)板,以確保充分混合。
  
  11。在5分鐘內(nèi),設(shè)置至450nm,使用酶標(biāo)儀測(cè)定各孔的光密度。如果波長校正,設(shè)置為540nm或570nm處。在540nm或570nm波長在450nm處的讀數(shù)減去讀數(shù)。該減法校正板的光學(xué)缺陷。在450nm處未經(jīng)修正讀數(shù)直接,可能會(huì)比較高,不太準(zhǔn)確。
  


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