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酶的載體結(jié)合法 交聯(lián)法 包埋法等固定化方法

閱讀:369發(fā)布時間:2017-7-12

酶的固定化方法不下百種,歸納起來大致可以分為三類,即載體結(jié)合法、交聯(lián)法和包埋法。

(一)載體結(jié)合法

載體結(jié)合法是指將酶固定到非水溶性載體上的方法。根據(jù)固定方式的不同,這種方法又可以分為物理吸附法、離子結(jié)合法和共價結(jié)合法。物理吸附法是指將酶吸附到固體吸附劑表面的方法,固體吸附劑多為活性炭和多孔玻璃等。離子結(jié)合法是指通過離子鍵將酶結(jié)合到具有離子交換基團的非水溶性載體上的方法,載體有離子交換樹脂等。共價結(jié)合法是指酶和載體以共價鍵的形式結(jié)合在一起的方法,這種方法需要酶和載體都具有氨基、羧基或羥基等官能團。

(二)交聯(lián)法

交聯(lián)法是指通過雙功能試劑,將酶和酶聯(lián)結(jié)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的方法。交聯(lián)法使用的交聯(lián)劑是戊二醛等水溶性化合物。

(三)包埋法

包埋法是指將酶包裹在多孔的載體中。例如,將酶包裹在聚丙烯酰胺凝膠等高分子凝膠中,或包裹在硝酸纖維素等半透性高分子膜中。前者包埋成格子型,后者包埋成微膠囊型。

與固定化酶技術(shù)相配套的是酶生物反應器。一個安裝有固定化酶材料的容器就是酶生物反應器,它是把反應物質(zhì)變成產(chǎn)品的重要生產(chǎn)車間。如葡萄糖溶液緩緩流進裝有葡萄糖異構(gòu)酶的生物反應器,出來的就是比原來溶液甜得多的新液體。

酶聯(lián)免疫吸附試驗

    酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是一種用酶標記抗原或抗體的方法,此法是將抗原、抗體免疫反應的特異性和酶的催化作用原理有機地結(jié)合起來的技術(shù),可敏感地檢測體液中微量的特異性抗體或抗原。


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