初步生化試驗(yàn)
在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上挑取5 個(gè)～10 個(gè)典
型或可疑菌落，分別接種TSI 瓊脂，同時(shí)接種MUG-LST 肉湯，并用已知MUG陽性的大腸埃希氏菌株做對(duì)照，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h。必要時(shí)進(jìn)行氧化酶試驗(yàn)和革蘭氏染色。在TSI 瓊脂中，典型菌株為斜面與底層均呈黃色，產(chǎn)氣或不產(chǎn)氣，不產(chǎn)生硫化氫（H2S）。置MUG-LST 肉湯管于長(zhǎng)波紫外燈下觀察，MUG陽性的大腸埃希氏菌株應(yīng)有熒光產(chǎn)生，大腸埃希氏O157:H7/NM 無熒光；對(duì)分解乳糖且無熒光的菌株，在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上分純，于36℃±1℃培養(yǎng)18h～24h，并進(jìn)行下列鑒定。
鑒定
血清學(xué)試驗(yàn)
在營(yíng)養(yǎng)瓊脂平板上挑取分純的菌落，用O157:H7 標(biāo)準(zhǔn)血清或O157 乳膠凝集試劑作玻片凝集試驗(yàn)。對(duì)于H7 因子血清不凝集者，應(yīng)穿刺接種半固體瓊脂，檢查動(dòng)力，經(jīng)連續(xù)傳代3 次，動(dòng)力試驗(yàn)陰性，H7 因子血清凝集陰性者，確定為無動(dòng)力株。
生化試驗(yàn)
用API20E 生化鑒定試劑盒或VITEK-GNI+檢測(cè)卡，按照生產(chǎn)商提供的使用
說明進(jìn)行。大腸埃希氏菌O157:H7/NM 生化反應(yīng)特征見表。
生化試驗(yàn) 特征反應(yīng)
三糖鐵瓊脂 底層及斜面呈黃色，H2S 陰性
* 陰性或遲緩發(fā)酵
靛基質(zhì) 陽性
MR-VP MR 陽性，VP 陰性
氧化酶 陰性
西蒙氏檸檬酸鹽 陰性
賴氨酸脫羧酶 陽性（紫色）
*脫羧酶 陽性（紫色）
纖維二糖發(fā)酵 陰性
棉子糖發(fā)酵 陽性
MUG 試驗(yàn) 陰性（無熒光）
動(dòng)力試驗(yàn) 有動(dòng)力或無動(dòng)力
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