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技術(shù)文章

高通量核酸提取組合方案

閱讀:338發(fā)布時間:2015-3-12

核酸提取,也許是現(xiàn)代生物學(xué)中zui基礎(chǔ)也zui重要的工作了。

疾病診斷,遺傳育種,藥物篩選,發(fā)育表達,分子進化… … 幾乎生物科學(xué)中每一個部分的研究,都離不開分離純化所需要的核酸組分。而且,隨著技術(shù)的進步,很多研究都向高通量方面靠攏,因為樣本的數(shù)量增多,得出的結(jié)果就更有統(tǒng)計學(xué)意義也更可信。

如果您面對一天上百個的樣品,你還能指望傳統(tǒng)的有機液相抽提法嗎?每個樣品都需要小心翼翼地將水相取出,多次重復(fù),不僅白白消耗了實驗人員的寶貴時間,還要忍受有機溶劑的熏陶,是在無法勝任繁重的抽提任務(wù)。



市面上已經(jīng)有不少標榜實現(xiàn)全自動核酸提取的自動化設(shè)備,價格相對比較合適,但其處理能力通常10-20個,而且使用專門的提取耗材和試劑,顯然不能解決問題。


市面上也有一些大型的設(shè)備,能完成整板96個樣品的額提取,但動則上百萬的購置費用顯然都太貴了。實驗經(jīng)費寶貴而有限,不能讓一個前處理設(shè)備如此喧賓奪主。



對于核酸提取設(shè)備,對它的要求就是可靠,可重現(xiàn),運行費用低。但目前市面上的多數(shù)自動化核酸提取設(shè)備,采用的是封閉式的操作系統(tǒng),無論是實驗方法,還是所用的試劑耗材,都必須從廠家那里付費獲得,造成運行費用高昂設(shè)備使用效率不高等問題;某些系統(tǒng)設(shè)計是具有開放性的,但需要用戶去設(shè)定復(fù)雜的運行程序,讓人望而卻步;還有的功能過于單一,還需要配合其他分液設(shè)備才能工作,同樣不盡人意。



花zui小的錢,辦zui多的事,一直是廣大科研人員孜孜以求的工作信念。德淙科儀誠意提供高通量的磁珠核酸提取組合方案,花小型自動核酸提取儀的價錢,實現(xiàn)大型工作站才能實現(xiàn)的高通量核酸提取之事。



標準組件:

微孔板恒溫振蕩器MB100-2A           Medusa96 高通量移液器                          磁鐵盤



選用組件:




Hettich 320 帶水平轉(zhuǎn)子            高通量組織研磨器                     密封墊以及密封墊封板器

組織,質(zhì)粒,植物                     植物,酵母,組織                     質(zhì)粒,細菌


標準組件已經(jīng)可以完成核酸分離純化過程,可進行全血,血清的核酸提取以及PCR產(chǎn)物純化。各種選用組件主要用于各種不同來源材料的前處理過程。

以全血DNA提取為例,介紹提取過程以及過程中每個組件的功能:


1.       血樣從*手動轉(zhuǎn)移到96孔盤:
這步操作zui為復(fù)雜,一方面*的規(guī)格不同于96
孔盤,另一方面,血樣存在血塊容易堵塞吸頭。
這步進行自動化操作,成本很高,技術(shù)難度很大。目前幾家大型的工作站廠家。

2.       加入磁珠和蛋白酶,然后裂解液,并吸噴混合:
由Medusa96移液器來完成。
溶液可放在各種規(guī)格的溶液槽中。

3.       加熱到50℃并震蕩孵育10分鐘:
由微孔板恒溫振蕩器來完成,充分裂解樣品并吸附DNA。

4.       放于磁鐵盤上吸附1-2分鐘,然后吸去廢液:
磁鐵盤放在Medusa96的盤面上,由用戶操作吸液頭將廢液給吸去。

5.       加液,震蕩,磁吸,去廢,重復(fù)多次
由Medusa96來承擔(dān)移液的任務(wù);微孔板恒溫振蕩器對磁珠進行充分洗滌。

6.       加液,震蕩,磁吸,收集,完成提取
由Medusa96來承擔(dān)移液的任務(wù);微孔板恒溫振蕩器對磁珠進行加熱洗脫。


整個過程大約只需要60分鐘,已經(jīng)包括血樣轉(zhuǎn)移,試劑準備的時間。

速度*可以與任何一個全自動的核酸提取平臺相比,甚至更好。


提取的結(jié)果:

采用同一批抗凝血200ul,提取出來的96個DNA

樣品進行凝膠電泳,觀察其完整性。


OD 260/280結(jié)果:

純度高,一致性很好

凝膠電泳結(jié)果:

分子完整,一致性很好

 





關(guān)于Medusa96高通量移液器:


Medusa96是一款96通道1000ul大體積的電子移液器,具有XYZ三維移動的平臺支架,方便操作者準確可靠地進行移動,定位。

移液范圍從10~1000ul,足夠滿足核酸提取的需求。

具備吸噴混合的功能,方便進行加樣前的磁珠混勻,以及提高裂解、洗滌、洗脫的效果。

具有4.3寸大屏幕高分辨率觸摸屏,方便用戶進行一吸一噴,一吸多噴等動作編排。


移液精度:

100ul CV < 0.8%,準確度±1ul(使用200ul tips)

1000ul CV < 0.5%,準確度±10ul(使用1000ul tips)







關(guān)于德淙科儀:


德淙科儀成立于2010年,是專注于為生命科學(xué)以及分子醫(yī)學(xué)研究者提供自動化設(shè)備的新型儀器設(shè)備制造商。公司目前主要產(chǎn)品有高通量移液器以及多盤位干浴器。公司也開展代理業(yè)務(wù),跟國內(nèi)外的主要行當(dāng)?shù)膹S家都有很好的渠道,能為廣大研究者提供的產(chǎn)品資訊,為實驗室的建設(shè)提供專業(yè)意見。


德淙科儀能為用戶提供本整合方案中所涉及的各種標準組件以及選用組件,并提供對整合方案效果的檢驗和評價服務(wù),價格合理,服務(wù)周到,歡迎廣大用戶前來咨詢選購。


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