技術(shù)解析：ELISA試劑盒的顯色弱問題

顯色一定要控制時間，根據(jù)試劑盒說明操作即可。一般來說，顯色時間過短，結(jié)果偏低；顯色時間過長，空白增高或者非特異性顯色增加。

ELISA顯色弱的可能原因

對應(yīng)的解決方法

超過有效期的產(chǎn)品可能會產(chǎn)生很弱的信號

檢查產(chǎn)品的有效期

加入試劑的體積和時間有誤

確定所使用的每一個試劑的體積正確的和加入的時間是適當(dāng)?shù)?/p>

試劑、樣品用前未能平衡

用前試劑、樣品置室溫平衡10分鐘左右

縮短孵育時間能使實驗的信號變?nèi)?/p>

檢查孵育的時間

在溫度變化的環(huán)境內(nèi)孵育酶標(biāo)板

確定孵育的溫度，應(yīng)避免溫度的變化

使用了被污染的試劑

檢查試劑是否被污染

標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本制備方法不規(guī)范

檢查標(biāo)準(zhǔn)品/標(biāo)本的制備，標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)按說明書進(jìn)行復(fù)溶和稀釋。低溫貯存的標(biāo)本避免反復(fù)凍融，嚴(yán)禁使用溶血標(biāo)本。樣品用NaN3防腐,抑制了酶的反應(yīng)

顯色底物制備不規(guī)范

檢查底物的制備，如體積是否正確，混合是否恰當(dāng)充分

檢測時間不當(dāng)

是否在規(guī)定的時間內(nèi)檢測

儀器設(shè)定不正確，濾光片不匹配

儀器是否設(shè)定正確，濾光片的使用等

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