科研人員報(bào)告了一種基因組編輯策略，它能增強(qiáng)改造人類T細(xì)胞的效率。盡管近來取得了使用CRISPR/Cas9工具的基因組編輯的進(jìn)展，對(duì)人類T細(xì)胞基因組進(jìn)行有效而專一的編輯仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)。使用由Cas9蛋白和實(shí)驗(yàn)室產(chǎn)生的單導(dǎo)向RNA分子組成的Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs），Alexander Marson 及其同事有效而專一地編輯了CXCR4的DNA序列，CXCR4為人類助手T細(xì)胞表面的一個(gè)免疫受體編碼，該受體讓艾滋病病毒成為可能。他們使用一種瞄準(zhǔn)被編輯的蛋白質(zhì)的細(xì)胞分類技術(shù)分離出了這種修改后的細(xì)胞，并且使用深度測(cè)序證實(shí)了這類編輯。此外，這組作者把Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs）與一個(gè)稱為同源導(dǎo)向修復(fù)模板的定制設(shè)計(jì)的單鏈DNA分子結(jié)合起來，從而選擇性地取代了從健康捐獻(xiàn)者分離出來的人類T細(xì)胞CXCR4 的核苷酸。使用一種類似的方法，這組作者證明了PD1 的靶向核苷酸取代，PD1為人類T細(xì)胞的一個(gè)免疫檢查點(diǎn)蛋白編碼，它是癌癥免疫療法的一個(gè)成熟的靶標(biāo)。由于短壽命的Cas9 核蛋白（Cas9 RNPs）通常在傳送到細(xì)胞后的24小時(shí)后轉(zhuǎn)變，在目標(biāo)是改造人類原生T細(xì)胞從而應(yīng)對(duì)免疫系統(tǒng)疾病的策略中，它們可能比讓細(xì)胞暴露在Cas9種的方法更安全。

原文檢索：Generation of knock-in primary human T cells using Cas9 ribonucleoproteins