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鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-II-E

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更新時(shí)間:2021-12-23 09:15:48瀏覽次數(shù):108次

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鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-II-E產(chǎn)品運(yùn)輸方式:干冰或者活體細(xì)胞運(yùn)輸,本公司會(huì)保證細(xì)胞運(yùn)輸中的存活率本公司細(xì)胞株低價(jià)保證質(zhì)量,免費(fèi)快遞直達(dá)。本公司擁有的專業(yè)細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)人員為您的細(xì)胞培養(yǎng)準(zhǔn)備詳細(xì)的技術(shù)咨詢。齊一生物科技(上海)有限公司:。Web:www.qiyibio.com

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鼠肝細(xì)胞瘤細(xì)胞 H-4-II-E細(xì)胞培養(yǎng)方法 
1、收到細(xì)胞,請(qǐng)查看瓶子是否有破裂,培養(yǎng)基是否漏出,是否渾濁,如有請(qǐng)盡快。
2、收到細(xì)胞,如包裝完好,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞。,由于運(yùn)輸過(guò)程中的問(wèn)題,細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的貼壁細(xì)胞有可能從瓶壁中脫落下來(lái),顯微鏡下觀察會(huì)出現(xiàn)細(xì)胞懸浮的情況,出現(xiàn)此狀態(tài)時(shí),請(qǐng)不要打開(kāi)細(xì)胞培養(yǎng)瓶,應(yīng)立即將培養(yǎng)瓶置于細(xì)胞培養(yǎng)箱里靜止3-5小時(shí)左右,讓細(xì)胞先穩(wěn)定下,再于顯微鏡下觀察,此時(shí)多數(shù)細(xì)胞會(huì)重新貼附于瓶壁。如細(xì)胞仍不能貼壁,請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,如臺(tái)盼藍(lán)染色證實(shí)細(xì)胞活力正常請(qǐng)按懸浮細(xì)胞的方法處理
3. 收到細(xì)胞時(shí)如無(wú)異常情況 ,請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察細(xì)胞密度,如為貼壁細(xì)胞,未超過(guò)80%匯合度時(shí),將培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基吸出,留下 5-10ML培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng):超過(guò)80%匯合度時(shí),請(qǐng)按細(xì)胞培養(yǎng)條件傳代培養(yǎng)。如為懸浮細(xì)胞,吸出培養(yǎng)液,1000轉(zhuǎn)/分鐘離心3分鐘,吸出上清,管底細(xì)胞用新鮮培養(yǎng)基懸浮細(xì)胞后移回培養(yǎng)瓶。
4,將培養(yǎng)瓶置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng),蓋子微微擰松。吸出的培養(yǎng)基可以保存在滅菌過(guò)的瓶子里,存放于4℃冰箱,以備不時(shí)之需。
5 、24小時(shí)后,細(xì)胞形態(tài)已恢復(fù)并貼滿瓶壁,就可以傳代了。(貼壁細(xì)胞)將培養(yǎng)瓶里的培養(yǎng)基倒去,加3-5ml(以能覆蓋細(xì)胞生長(zhǎng)面為準(zhǔn))PBS或Hanks’液洗滌后棄去。加0.5-1ml  0.25%含EDTA的*消化,消化時(shí)間以具體細(xì)胞為準(zhǔn),一般1-3分鐘,不超過(guò)5分鐘??梢苑湃?7℃培養(yǎng)箱消化。輕輕晃動(dòng)瓶壁,見(jiàn)細(xì)胞脫落下來(lái),加入3-5ml培養(yǎng)基終止消化。用移液管輕輕吹打瓶壁上的細(xì)胞,使之*脫落,然后將溶液吸入離心管內(nèi)離心,1000rpm/5min。棄上清,視細(xì)胞數(shù)量決定分瓶數(shù),一般一傳二,如細(xì)胞量多可一傳三,有些細(xì)胞不易傳得過(guò)稀,有些生長(zhǎng)較快的細(xì)胞則可以多傳幾瓶,以具體細(xì)胞和經(jīng)驗(yàn)為準(zhǔn)。(懸浮細(xì)胞)用移液管輕輕吹打瓶壁,直接將溶液吸入離心管離心即可。
6,貼壁細(xì)胞 ,懸浮細(xì)胞。嚴(yán)格無(wú)菌操作。換液時(shí),換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶和換新鮮的培養(yǎng)液,37度    5%CO2 培養(yǎng)
7.  收到細(xì)胞后,請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞,用恰當(dāng)方式處理細(xì)胞。若懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)離心收集細(xì)胞,接種到一個(gè)新的培養(yǎng)瓶中。棄掉原液,使用新鮮配制的培養(yǎng)基,使用進(jìn)口胎牛血清. 剛接到細(xì)胞,若細(xì)胞不多時(shí) 血清濃度可以加到15%去培養(yǎng)。若細(xì)胞迏到80%左右 ,血清濃度還是在10%。
培養(yǎng)基參考
500ml基礎(chǔ)培養(yǎng)基(含:必需與非必需氨基酸、維他命、有機(jī)與無(wú)機(jī)成分、激素、生長(zhǎng)因子與微量元素)、細(xì)胞生長(zhǎng)添加劑、抗生素/抗菌素溶液或*/*(P/S)溶液、FBS,適合在飽和濕度為5%CO2與95%空氣的培養(yǎng)箱中使用
200ul疊裝滅菌帶刻度黃色吸頭    5 小疊 / 盒, 10 盒 / 箱
250ul帶刻度透明吸頭    1000 Tips / 包,  20 包 / 箱
250ul低吸附帶刻度透明吸頭     1000 Tips / 包,  20 包 / 箱
250ul盒裝低吸附帶刻度透明吸頭    96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
250ul盒裝滅菌低吸附帶刻度透明吸頭    96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
250ul疊裝低吸附帶刻度透明吸頭    96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
250ul 盒裝帶刻度透明吸頭    96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
250ul 盒裝滅菌帶刻度透明吸頭    96支 / 盒, 5 0盒 / 箱
0.1-10ul加長(zhǎng)型槍頭    1000 Tips / 包, 20 包 / 箱
0.1-10ul Ultra Micro Maxymum Recovery Extra Long Clear Pipet Tips for Pipetman P2/P10 and Eppendorf Research/Reference.    1000 Tips / 包, 20 包 / 箱
0.1-10ul Maxymum Recovery Ultra Micro Extra Long Clear Pipet Tips for Pipetman P2/P10 and Eppendorf Research/Reference.    10 盒 / 包, 5 包 / 箱
0.1-10ul Maxymum Recovery Pre Sterilized Ultra Micro Extra Long Clear Pipet Tips for Pipetman P2/P10 and Eppendorf Research/Reference.    10 盒 / 包, 5 包 / 箱
0.1-10ul 盒裝加長(zhǎng)型槍頭    10 盒 / 包, 5 包 / 箱
0.1-10ul 滅菌盒裝加長(zhǎng)型槍頭    10 盒 / 包, 5 包 / 箱
10ul加長(zhǎng)型濾芯透明吸頭    1000 Tips / 包, 10 包 / 箱
0.1-10ul盒裝滅菌低吸附加長(zhǎng)型透明吸頭    10 盒 / 包, 5 包 / 箱

0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管,彩色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管, 藍(lán)色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml 八連排透明PCR薄壁管    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml無(wú)色凸蓋PCR八聯(lián)管(含蓋)    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml,PCR薄壁管,8聯(lián)管,帶平蓋,無(wú)色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管, 綠色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管, 桔色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管,紅色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管 ,8 聯(lián)管, 紫色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管 ,8 聯(lián)管, 棕色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管,8 聯(lián)管, 黃色    125 Strips / 包, 10 包 / 箱
0.2mL PCR 薄壁管,12聯(lián)管,帶蓋子(平蓋)    80 Strip tubes and Caps / 包, 10 包 / 箱
0,2ml彩色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0,2ml藍(lán)色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml透明平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml彩色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml藍(lán)色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml綠色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml桔色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml紅色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml紫色PCR八排管鼓蓋    125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml黃色PCR八排管鼓蓋     125 Caps / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)彩色混裝    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)藍(lán)色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml透明圓蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)綠色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)無(wú)色低吸附    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)桔色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)紅色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)彩色混裝    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱 
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)紫色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR 薄壁管(圓蓋)黃色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml綠色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml透明平蓋低吸附PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR薄壁管(無(wú)蓋)    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR薄壁管(平蓋)桔色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR薄壁管(平蓋)紅色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml 薄壁管(平蓋)彩色混裝    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱 
0.2ml PCR薄壁管(平蓋)紫色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml PCR薄壁管(平蓋)黃色    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 彩色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 藍(lán)色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 透明平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 綠色PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 無(wú)色低吸附PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 桔色PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 紅色PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 彩色混裝PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱 
0.5ml 紫色平蓋PCR薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.5ml 黃色PCR平蓋薄壁管    1000 Tubes / 包, 10 包 / 箱
0.2ml彩色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml藍(lán)色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml黑色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml透明無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml綠色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml桔色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml紅色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml紫色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml黃色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml彩色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml藍(lán)色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml黑色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml透明無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml綠色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml桔色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml紅色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml紫色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
0.2ml黃色無(wú)裙邊24孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul藍(lán)色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul黑色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul透明384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul綠色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul桔色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul紅色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul紫色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul白色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
55ul黃色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
40ul藍(lán)色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
40ul黑色384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔透明PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
40ul透明滅菌384孔PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔綠色PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384 Well PCR Microplate for Roche 480 Light Cycler, Natural (No Film)    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384 Well PCR Microplate for Roche 480 Light Cycler, White (w/Film)    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384 Well PCR Microplate for Roche 480 Light Cycler, White Bar-Coded (w/Film)    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384 Well PCR Microplate for Roche 480 Light Cycler, White (No Film)    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔彩色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔藍(lán)色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔黑色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔透明半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔綠色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔桔色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔紅色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔紫色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔白色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔黃色半裙邊PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔桔色PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384孔紅色PCR板    10 Plates / 包,  5 包 / 箱
384 Well Blue Rigi Plate PCR Microplate.    2 小袋 / 包, 5 包 / 箱

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