試劑盒名稱：小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒
規(guī) 格：48T/96T
品牌：進(jìn)口原裝/分裝/國產(chǎn)
產(chǎn)品的用途：僅供科研究使用！
價(jià)格：電議,咨詢?cè)诰€客服,或者以郵件形式發(fā)到我司qysw@qiyibio.com。齊一生物科技（上海）有限公司提供大量品牌進(jìn)口原裝、以及穩(wěn)定性強(qiáng)的國產(chǎn)ELISA試劑盒，性價(jià)比*。歡迎您前來選購！
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒操作步驟
實(shí)驗(yàn)開始前，請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?，試劑或樣品稀釋時(shí)，均需混勻，混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時(shí)，用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣：分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔?？瞻卓准訕悠废♂屢?00μl，余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl，注意不要有氣泡，加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜，37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性，每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加標(biāo)記抗體工作液 100μl（取1μl標(biāo)記抗體加99μl標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時(shí)內(nèi)配制），37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液（同標(biāo)記抗體工作液） 100μl，37℃，60分鐘。
5.         溫育60分鐘后，棄去孔內(nèi)液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，350μl/每孔，甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內(nèi)，此時(shí)肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色，后3-4孔梯度不明顯，即可終止）。
7.         依序每孔加終止溶液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性，底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。
注：
1. 用戶在初次使用試劑盒時(shí)，應(yīng)將各種試劑管離心數(shù)分鐘，以便試劑集中到管底。
2. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時(shí)先用此孔調(diào)OD值至零。
3. 為防止樣品蒸發(fā)，試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi)，酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
4. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑，請(qǐng)于2-8℃保存。標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過的標(biāo)準(zhǔn)品、標(biāo)記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液。
5. 建議檢測樣品時(shí)均設(shè)雙孔測定，以保證檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。
小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒洗板方法
手工洗板方法：吸去（不可觸及板壁）或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體；在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙，酶標(biāo)板朝下用力拍幾次；將的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內(nèi)，浸泡1-2分鐘。根據(jù)需要，重復(fù)此過程數(shù)次。
自動(dòng)洗板：如果有自動(dòng)洗板機(jī)，應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過程中。
計(jì)算
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)（對(duì)數(shù)坐標(biāo)），OD值為縱坐標(biāo)（普通坐標(biāo)），在半對(duì)數(shù)坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng)
1. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩，避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要，不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，使用排槍加樣。
4. 請(qǐng)每次測定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。
5. 如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高，請(qǐng)先稀釋后再測定，計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以稀釋倍數(shù)。
6. 在配制標(biāo)準(zhǔn)品、檢測溶液工作液時(shí)，請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液配制，不能混淆。
7. 底物請(qǐng)避光保存。
8. 不要用其它生產(chǎn)廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。  

小鼠糖原磷酸化酶同工酶II(GP-II)ELISA試劑盒其它產(chǎn)品TCF1 (C63D9) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjugate)    6709S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Development    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
Synapsin-1 (D13C1) Rabbit mAb    6710S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
BrdU Cell Proliferation Assay Kit    6813S    美國Cell Signaling Technology(CST)    1Kit    Screening Technologies    齊一生物    Assay Kit    -20C
RBAP46 (V415) Antibody    6882S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
SignalFire™ECL Reagent    6883S    美國Cell Signaling Technology(CST)    500ml    Companion Products    齊一生物    Detection System    RT
Phospho-REPS1 (Ser709) Antibody    6884S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Cytoskeletal Signaling    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
T7-Tag Antibody    6885S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Tag Antibodies    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
Phospho-ULK1 (Ser317) Antibody    6887S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Autophagy Signaling    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
Phospho-ULK1 (Ser757) Antibody    6888S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Autophagy Signaling    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
BRM Antibody    6889S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
BORIS Antibody    6890S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
Menin (D45B1) XP® Rabbit mAb    6891P    美國Cell Signaling Technology(CST)    40µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Menin (D45B1) XP® Rabbit mAb    6891S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
SMC1 (8E6) Mouse mAb    6892S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Cell Cycle / Checkpoint    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
HMGB1 (D3E5) Rabbit mAb    6893S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Chromatin Regulation / Epigenetics    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Cleaved PARP (Asp214) (D64E10) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 555 Conjugate)    6894S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Apoptosis    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
COPS5 Antibody    6895S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Stability    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
Plexin A2 (D44D4) Rabbit mAb    6896S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Bassoon (D63B6) Rabbit mAb    6897S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
β-Catenin (L54E2) Mouse mAb (PE Conjugate)    6898S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Development    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
Mouse (G3A1) mAb IgG1 Isotype Control (PE Conjugate)    6899S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Companion Products    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
CHFR (D40H6) Rabbit mAb    6904S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Cell Cycle / Checkpoint    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
FAIM Antibody    6907S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Apoptosis    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
Phospho-p38 MAPK (Thr180/Tyr182) (3D7) Rabbit mAb (PE Conjugate)    6908S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    MAPK Signaling    齊一生物    Monoclonal Antibody    4C
SignalSilence® Akt1 siRNA I (Mouse Specific)    6909S    美國Cell Signaling Technology(CST)    300µl    PI3K / Akt Signaling    齊一生物    siRNA    -20C
SignalSilence® PI3 Kinase p85α siRNA I (Mouse Specific)    6912S    美國Cell Signaling Technology(CST)    300µl    PI3K / Akt Signaling    齊一生物    siRNA    -20C
Argonaute 4 (D10F10) Rabbit mAb    6913S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Translation    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
DGCR8 (D78E4) Rabbit mAb    6914S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Translation    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Miwi (D92B7) XP®Rabbit mAb    6915P    美國Cell Signaling Technology(CST)    40µl    Protein Translation    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Miwi (D92B7) XP®Rabbit mAb    6915S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Translation    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
4EHP (D54C2) Rabbit mAb    6916S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Protein Translation    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
GFAT2 (D40C7) Rabbit mAb    6917S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
IRAP (D7C5) XP® Rabbit mAb    6918P    美國Cell Signaling Technology(CST)    40µl    Metabolism    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
IRAP (D7C5) XP® Rabbit mAb    6918S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
SIK2 (D28G3) Rabbit mAb    6919S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
Mena (D33C1) Rabbit mAb    6921S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Neuroscience    齊一生物    Monoclonal Antibody    -20C
ACO2 Antibody    6922S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C
PANK2 Antibody (Mouse Specific)    6923S    美國Cell Signaling Technology(CST)    100µl    Metabolism    齊一生物    Polyclonal Antibody    -20C