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我們在ELISA試劑盒實驗的時候,我們經(jīng)常都需要用到封閉液顯示液,那么封閉液顯示液的配置步驟有哪些呢?今天上海紀寧生物教如何配制封閉液顯示液的方法:
1、包被緩沖液(0.05mol/L碳酸鈉-碳酸氫鈉緩沖液,pH 9.6):取1.6g碳酸鈉及2.9g碳酸氫鈉,加雙蒸水至1000mL,調(diào)pH至9.6。
2、封閉液(1%BSA/PBS溶液):1g BSA,100mL PBS。
3、樣本稀釋液(PBS,pH7.4):取Na2HPO4.12H2O 68.8g,NaH2PO4 6.9g,NaCl 45g,加雙蒸水至1000mL,調(diào)節(jié)pH至7.4。
4、洗滌液(PBST,pH 7.4):取Na2HPO4.12H2O 68.8g,NaH2PO4 6.9g,NaCl 45g,Tween-20 0.5mL,加雙蒸水至1000mL,調(diào)節(jié)pH至7.4。
底物液A:取無水乙酸鈉8.2g,β-糊精2.5g,過氧化氫脲428.6mg,加雙蒸水至1000mL,調(diào)節(jié)pH至5.0,4℃保存,使用時達室溫;
底物液B:取100mgTMB溶于10mL DMSO中,棕色瓶保存;
使用前將14.6mL底物液A和0.45mL底物液B混合15min;
終止液:1.25mol/L的H2SO4溶液。
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