腎上腺素的提取和測(cè)定
目的要求
1、了解腎上腺素的結(jié)構(gòu)和功能
2、學(xué)習(xí)提取及測(cè)定腎上腺素的原理和方法
實(shí)驗(yàn)原理
腎上腺素是腎上腺髓質(zhì)分泌的激素，在微酸性介質(zhì)中，腎上腺素與三價(jià)鐵和鄰菲羅琳混合液反應(yīng)，生成三亞鐵配位化合物，即亞鐵鄰菲羅琳離子，該配位化合物在510nm處有zui大吸收。本法具有簡(jiǎn)易、迅速、選擇性好、靈敏度高的特點(diǎn)。
試劑和器材
1、試劑
腎上腺素標(biāo)準(zhǔn)溶液：取腎上腺素約20mg精密稱重置1000mL容量瓶中，加0.02mol/L HCI使之溶解，并用水稀釋至刻度，搖勻。
顯色劑：取0.1988g鄰菲羅琳水合物，加1mol/L HCI2mL，硫酸鐵銨0.16g，用水溶解并稀釋至100ml，搖勻。既得。
2、材料
新鮮豬腎上腺
3、器材
試管10mL（×9），錐形瓶50mL，研缽，漏斗，濾紙，分光光度計(jì)。
操作方法
1、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線
取6支試管編號(hào)后，加入試劑：加畢，混勻。放置3min，加水稀釋至刻度，用1cm比色杯，試劑空白為參比，測(cè)定510nm處吸光值，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
2、腎上腺素的提取
取新鮮豬腎上腺2g，置于研缽中，加入5mL 0.1mol/L HCI及少許海砂研磨成糊狀。移入50mL錐形瓶中，再加15mL 0.1mol/L HCI。在沸水浴中煮5min后，加入7mL10%乙酸鈉，在煮1min。冷卻后，過濾收集濾液。
3、樣品測(cè)定
取3支試管編號(hào)后，分別加入試劑，與標(biāo)準(zhǔn)曲線同時(shí)作比色測(cè)定：加畢，混勻，放置3min，加水稀釋至刻度，用1cm比色杯，試劑空白為參比，測(cè)定510nm處吸光值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線中可查出樣品中腎上腺素的含量。
注意事項(xiàng)
腎上腺素對(duì)光極不穩(wěn)定，故在稱量及其他操作中應(yīng)盡量縮短時(shí)間、避光，以免引起誤差。
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