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南京科捷檢測(cè)科技發(fā)展有限公司
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閱讀：3553發(fā)布時(shí)間：2017-5-15
油菜籽中一般含有10多種硫苷，而目前常用測(cè)定硫苷的反相色譜法，難以準(zhǔn)確測(cè)定其中的吲哚類硫苷，因?yàn)樵跇悠奉A(yù)處理時(shí)要用硫酸酯酶對(duì)硫苷脫硫酸根，因此，樣品處理要放置過夜，使硫苷由離子型物質(zhì)轉(zhuǎn)化為醇類物質(zhì)后再上機(jī)分析。另外其操作步驟繁瑣，耗時(shí)過多。有報(bào)道采用反相離子對(duì)色譜法可直接測(cè)定十字花科植物中完整的硫苷，這種方法優(yōu)點(diǎn)在于樣品處理不需要用硫酸酯酶對(duì)硫苷脫硫酸根，當(dāng)日處理的樣品即可上機(jī)分析，但對(duì)油菜籽中硫苷測(cè)定方法尚未*建立起來。本實(shí)驗(yàn)在此基礎(chǔ)上對(duì)反相離子對(duì)色譜法測(cè)定油菜籽中硫苷的各種色譜條件、定性定量分析。
實(shí)驗(yàn)主要儀器：
LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式，增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。
廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。
樣品預(yù)處理：
反相離子對(duì)色譜法：稱取脫脂菜籽0.4000g于干燥有刻度試管中， 在沸水中干蒸10min后加入8ml沸水提取20min，冷卻后加入內(nèi)標(biāo)物溶液1ml（烯丙基硫苷，1mmol／L），再加入0.5mol／L醋酸鉛和醋酸鋇混合液1ml，搖勻后水浴上溫?zé)?，放置稍冷后離心10min。取上清液 2.5ml加入到DEAE-葡聚糖凝膠A-25（5mm×100mm） 層析小柱中，待溶液流干后，用約5ml醋酸吡啶洗滌，再用重蒸水洗滌。zui后用0.5mol／L硫酸鉀溶液4ml洗脫，收集洗脫液并定容到10ml，搖勻后用微孔過濾器過濾，濾液供色譜分析。與此同時(shí)進(jìn)行反相色譜法的樣品預(yù)處理，用作對(duì)照。
色譜條件：
色譜柱 | YWG-C18H37（10μm，250mm×4mm） |
柱溫 | 30℃ |
流動(dòng)相 | 含4.5mmol／L四丁*的0.02 mol／L磷酸緩沖液（pH=6） 和乙腈（90／10，v／v） |
流速 | 1ml／min |
色譜圖：
油菜籽中硫苷分離的色譜圖
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