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液相色譜儀之液相色譜法測(cè)定醬油中的7種有機(jī)酸

閱讀:1404發(fā)布時(shí)間:2017-5-22

 

醬油是我國(guó)的傳統(tǒng)發(fā)酵調(diào)味品,由于其*的風(fēng)味、色澤以及豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值,已成為我國(guó)、日韓、東南亞各國(guó)乃至歐美人民飲食生活中*的調(diào)味品。醬油中含有多種有機(jī)酸,zui主要的是乳酸,其次是焦*,此外還會(huì)有較少量的琥珀酸、檸檬酸、醋酸、蘋果酸等,多種有機(jī)酸在酸味及風(fēng)味方面對(duì)醬油的風(fēng)味起到了一定的綜合作用,但是焦*是沒(méi)有鮮味的,對(duì)醬油風(fēng)味是不起作用的。醬油生產(chǎn)過(guò)程中蛋白質(zhì)原料經(jīng)蛋白酶作用產(chǎn)生*,再由*酶分解成*,但是當(dāng)醬油曲料中缺乏*酶或其酶活力偏低時(shí),*便會(huì)經(jīng)非酶解的渠道生成焦*。與此同時(shí),當(dāng)*濃度較低時(shí),*轉(zhuǎn)化成焦*的反應(yīng)也會(huì)比較激烈。

一般醬油中的有機(jī)酸含量多以總酸為代表,但多種有機(jī)酸在不同條件下解離出氫離子的程度不同,各種有機(jī)酸的解離度也不同,所以總酸作為測(cè)酸指標(biāo)并不能恰如其分地反映酸的程度。

目前國(guó)內(nèi)對(duì)于醬油中有機(jī)酸的研究比較多,所采用的分析方法主要有氣相色譜法(GC)、液相色譜法(HPLC)、離子色譜法(IC)等,但是關(guān)于醬油中焦*含量的檢測(cè)報(bào)道較少。

實(shí)驗(yàn)采用固相萃取-液相色譜法測(cè)定醬油中焦*等7種有機(jī)酸的含量,該方法能有效解決醬油蛋白質(zhì)和色素含量高導(dǎo)致干擾有機(jī)酸分析以及造成色譜柱污染等問(wèn)題,分析速度快,靈敏度高,結(jié)果準(zhǔn)確。

 

實(shí)驗(yàn)儀器設(shè)備:

LC600B型液相色譜儀

LC-600B智能全控液相色譜系統(tǒng)由1臺(tái)P600B高壓恒流泵、1臺(tái)UV600B紫外檢測(cè)器與1臺(tái)SCL600B系統(tǒng)控制器直接構(gòu)成梯度分析系統(tǒng)。*采用柱塞浮動(dòng)式安裝方式,增強(qiáng)儀器性能的穩(wěn)定性和使用的持久性。

廣泛應(yīng)用于研究開發(fā)、醫(yī)藥檢驗(yàn)、食品檢測(cè)、化工分析、監(jiān)測(cè)等眾多分析領(lǐng)域。

固相萃取小柱

全自動(dòng)電位滴定儀

 

樣品前處理 :

稱取醬油樣品10.0 g于100 mL燒杯中,加入約40 mL水,用10%氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值至8.2,轉(zhuǎn)入100 mL容量瓶中,定容至刻度。將固相萃?。⊿PE)小柱以此用3 mL甲醇活化,3 mL水平衡,備用。吸取0.50 mL上述醬油溶液轉(zhuǎn)移至固相萃取柱中以自然流速過(guò)柱,待樣品全部吸附后用3 mL水淋洗,流速約3 mL/min,抽至近干后,用2.00 mL鹽酸(1+20)以不超過(guò)1 mL/min流速洗脫。洗脫液過(guò)0.22 μm微孔濾膜后,供HPLC分析。

 

色譜條件:

色譜柱

Agilent SB-Aq(150 mm×4.6 mm×5 μm)

流動(dòng)相

0.01 mol/L磷酸氫二銨,用磷酸調(diào)至pH=2.7

流速

0.7 mL/min

柱溫

35 ℃

波長(zhǎng)

210 nm

進(jìn)樣量

20 μL

 

色譜圖:

 

                有機(jī)酸混合標(biāo)準(zhǔn)色譜圖

 


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