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南京科捷檢測科技發(fā)展有限公司
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閱讀：734發(fā)布時間：2020-9-11
黃曲霉**是由黃曲霉和寄生曲霉次級代謝產(chǎn)生的一組化學結(jié)構(gòu)類似的化合物，對人類和家畜的健康有很大的危害性。植物來源的樣品中通常易污染AFB1、AFB2、AFG1、AFG2，它們具有ji強的急性毒性，是目前已知毒性zui強的化合物之一，并有確切的三致作用，其中AFB1毒性zui強。GB2761-2011規(guī)定在一般糧谷類制品中AFB1的*為5-20μg/kg，歐盟規(guī)定AFB1在食品中的殘留*為2μg/kg，黃曲霉***總量（AFB1+AFB2+AFG1+AFG2）小于4μg/kg。高效液相色譜法熒光檢測是黃曲霉**分析的主要手段，為了提高檢測靈敏度需要進行衍生化，常用的衍生化方法有柱前三氟乙酸衍生，柱后溴衍生法，柱后碘衍生化等，這些衍生化方法操作繁瑣，重現(xiàn)性受人為因素影響很大，且需要使用刺激性強的試劑，對檢測人員的技術(shù)要求較高。分析化學家協(xié)會標準AOAC Offical Method 2005.08采用柱后光化學衍生-液相色譜法檢測黃曲霉**，在 樣品凈化過程中使用免疫親和柱。本研究采用聚乙多重吸附原理的多功能柱對提取液進行凈化，高效液相色譜分離-柱后光化學衍生-熒光檢測，進一步降低了檢測成本，具有操作簡單、靈敏度高、環(huán)保等特點，適用于食品中黃曲霉**的日常檢測。
儀器準備
儀器簡介
LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時控制數(shù)臺P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測器及恒溫柱箱等，實行多元高壓洗脫、波長掃描等功能。
應(yīng)用領(lǐng)域
化合物檢測、法醫(yī)毒物分析、蛋白質(zhì)組學食品檢測、藥物分析、環(huán)境分析、聚合物分析
樣品前處理：
準確稱取混勻且*粉碎的樣品25.00g于250ml錐形瓶中，加入100ml乙腈-水（84:16），高速均質(zhì)2min，浸泡30min，超聲提取30min，10000rpm離心5min，收集上清液。取8ml上清液至多功能凈化柱的玻璃管中，將凈化柱緩緩推入玻璃管底部，吸取4.0ml凈化柱上部凈化液，在50℃水浴中氮氣吹干，加入1.0ml流動相溶解，渦旋混勻30s，經(jīng)0.22μm濾膜過濾，制備成待測樣液。
色譜條件：
色譜柱 | XSE-LECT HSS T3（4.6×150mm，5μm） |
流動相 | 甲醇/水=38/62等度洗脫 |
流速 | 1.0mL/min |
熒光檢測器 | 激發(fā)波長360nm，發(fā)射波長440nm |
柱溫 | 40℃ |
進樣量 | 20μL |
譜圖分析：
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