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elisa實驗避免加樣出錯的小竅門

閱讀:277發(fā)布時間:2015-3-26

elisa實驗避免加樣出錯的小竅門

大家在做ELISA酶聯(lián)免疫試劑盒的時候是不是經(jīng)常會出現(xiàn)樣品加錯或重復(fù)添加的情況呢?那么怎樣能zui大限度的避免這種情況的發(fā)生呢,下面上海研晶的實驗經(jīng)歷分享給大家來解決這個問題。

ELISA是免疫學(xué)中常用檢測方法,加樣時淡黃色的血清能明顯的區(qū)分哪個孔加了哪個孔沒加。但是有一些項目,需要稀釋血清(例如在做乙肝病毒核心抗體時是要稀釋血清30倍),稀釋后淡黃色的血清近乎無色,加樣時非常容易搞錯,很難區(qū)分哪個孔加過哪個孔沒加過。在ELISA中一般有3次加樣步聚,即加標(biāo)本,加酶結(jié)合物,加底物。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下倒置混和,不要在混勻器上強烈振蕩。ELISA試劑盒制備血漿標(biāo)本需借助于抗凝劑,而血清標(biāo)本只要待血清天然凝固、血塊收縮后即可取得。也可在板孔中加入稀釋液,再在其加入血清標(biāo)本,然后在微型震蕩器上震蕩1分鐘以保證混和。

下面舉幾個小竅門,來避免加樣出錯:

1.用一張寫滿字的紙,字越多越好,比如報紙,墊在下面,這樣,加過標(biāo)本的小孔看過去下面的字會變小,沒加的字正常,非常容易區(qū)分。

2.可以利用液面反光與沒有加的孔加以區(qū)別。

3.在標(biāo)本加完后,再把加樣槍全壓下,使液面產(chǎn)生小氣泡,也可以加以區(qū)分。


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