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閱讀:582發(fā)布時間:2015-6-25
實驗方法原理 一、*法
(一)、流式細胞儀法:
是根據(jù)流式細胞儀工作原理專為尿液沉渣分析而設計,這類儀器價格較低,分析效率較高,尿液標本可不用離心,主要用于尿液細胞成分(紅細胞、白細胞,和上皮細胞)的分析,這類儀器不僅可測定細胞數(shù)量,還可測量細胞容積和對某些細胞分類,如測定尿液紅細胞容積(MCV)及容積分布密度(RDVV),有助于鑒別紅細胞來源,(上尿路或下尿路出血)尿液白細胞中,淋巴細胞嗜酸性粒細胞和中性粒細胞的分類計數(shù),對泌尿系統(tǒng)感染和腎移植排斥的診斷和鑒別診斷有重要意義。
但這類儀器還不能測量除細胞以外的其它有形成分如管型,有意義的結晶等。
(二)圖形識別法
農業(yè)大學儀器的主要代表是“自動智能顯微鏡"。這種儀器主要在顯微鏡下加①鞘流(sheath flow)方式的流流動裝置,②高速頻閃光源和電視攝像的光學系統(tǒng)③計算機對圖像分析這三個部分組成。
工作原理是將混合尿液(6ml以上)液入儀器的標本入口,通過粗網(wǎng)過濾。以除去粘液絲等物,自動加入染色液,染色后的尿導入鞘流液內,以平板式流動池中作層狀流動尿液中的有形成分流至顯微鏡視野時,以每秒60次的高頻閃光作為光源,經電視攝像得到連續(xù)的靜止圖像,用計算機對電視圖像中顆粒(500-2000個)的形態(tài)大小進行分類(與已貯存的管型,上皮細胞、紅細胞和白細胞等的形態(tài)資料比較)并計算出各自的波度,異常顆粒從監(jiān)視鏡中用眼觀判定或錄像作進一步研究。
這種儀器每小時可檢測60份尿標本,儀器價格較昂貴。
二、尿沉渣定量分析板的應用法
目前歐美一些國家已推出尿沉渣定量分析板進行尿沉渣檢驗,該系統(tǒng)包括:
1. 尿沉渣離心管:是專為*設計的離心管,帶有宣刻度,可放10ml尿液,管底有一個“凸凸頭",當?shù)谷ルx心后的上清尿時,在“凸凸"頭的尿沉渣不會流出,留下尿沉渣是0.25ml(也可用變通離心管代用)。
2. 尿沉渣定量分析板(硬質塑料平板)每塊分析板有10個均一厚度(0.1mm)計算池,每個計算池內有固定體積(1微升)的計算區(qū)(計算區(qū)內劃分為10個中方格,每一中方格內以劃分為9個小方格)
實驗步驟
1、取均勻混合尿10ml于尿沉渣離心管內1500 r/min離心 5 分鐘,倒去上清。
2、取1小滴(15-20微升)尿沉渣沖入定量分析板一個計算池中,然后用低倍鏡觀察,高倍鏡計數(shù),計算在1微升計算區(qū)內紅細胞、白細胞、上皮細胞和各類管型的數(shù)量。
也有的國家采用不離心的混合尿,沖入定量分析板計算池內,在計算區(qū)內計數(shù)尿沉渣中上述有形成分的數(shù)量。
尿沉渣定量分析板鏡檢,有很好的應用價值,一次能測 10 份尿標本,操作簡便。
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