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Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實驗診斷方法,ELISA試劑盒實驗中有很多因素影響著實驗結(jié)果,導致出現(xiàn)“花板"問題。為了避免“花板"問題的出現(xiàn),降低檢測的假陽性率,獲得更理想的實驗結(jié)果,首先我們在選擇ELISA試劑時,應選擇靈敏度高、特異性好、穩(wěn)定性好、批間差小、價格操作方便、省時的試劑。并在檢驗的過程中應采取下列措施:ELISA試劑盒
(1)檢測之前,加大離心轉(zhuǎn)速,盡量延長時間,使血細胞和纖維蛋白充分沉淀,讓血細胞與血清*分離。
(2)抽取樣本時應抽出足夠檢驗量的血液標本,選擇無添加劑的真空試管,ELISA試劑盒便于離心,得到足夠的血清。
(3)血液標本應置于室溫下1~2h,使血液凝固收縮,然后離心檢測或讓血液過夜后再檢測。這樣才能使得血液充分收縮,讓標本中的非特異性物質(zhì)所致的假陽性率降至zui低。ELISA試劑盒
(4)加樣時不能加入紅細胞或纖維蛋白,要按照操作說明書去做,否則會影響實驗結(jié)果。
(5)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導致“花板"的出現(xiàn)。
(6)手工洗板時應注意液體被濺出或孔與孔之間的液體溢出,連成整體液面后產(chǎn)生“花板"。
(7)洗液的溫度也會影響洗板的干凈程度,尤其是冬天溫度過低時容易出現(xiàn)“花板"問題。
(8)用洗板機洗板時應防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產(chǎn)生拖帶現(xiàn)象而導致“花板"的出現(xiàn)。
因此,ELISA試劑盒出現(xiàn)“花板"原因可能是在標本的處理,特別是放置時間、離心速度和離心時間及溫度方面的問題。所以,標本的處理就成為實驗結(jié)果的主要可疑因素。ELISA試劑盒
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