電鏡組織化學 技術是在光鏡組織化學基礎上發(fā)展起來的形態(tài)學研究技術，它將組織化學與電鏡技術相結合，使組織化學研究從光鏡微細結構水平發(fā)展到電鏡超微結構水平。電鏡組織化學技術將組織細胞中特定的化學成分通過特定的化學反應形成反應產(chǎn)物，然后使其形成電鏡下易于觀察的高電子密度不溶性沉淀物，從而在超微結構水平對特定化學成分進行原位分析，由此將生物化學與超微結構有機起來，顯示組織細胞內各種固有化學成分的定位。電鏡組織化學技術主要檢測一些酶的活性及其在超微結構的定位。雖然目前已知酶的種類超過2200余種，但電鏡組織化學能顯示的不超過100種。

一、酶組織化學反應過程

欲觀察某些酶類在細胞內的分布，可通過酶的細胞化學反應顯示酶的存在部位，即在一定條件下，利用細胞內的酶作用于相應底物的特性，使酶與底物在酶所在部位形成中間復合體，即易溶于水的酶反應產(chǎn)物(也稱初級反應產(chǎn)物)，此過程系酶作用于底物的酶反應過程，為特異性反應；當捕捉劑，如電子供體等存在時，該中間復合體迅速轉變成不溶的沉淀物(也稱zui終反應產(chǎn)物)，此階段為捕捉反應，為非特異性的，形成的終產(chǎn)物經(jīng)適當處理可在電鏡下進行定性定位分析。

二、酶反應底物的特異性

一般認為酶作用的底物具有較嚴格的選擇性。這也是酶細胞化學反應的基礎，所以實驗中應盡量保證酶反應的特異性。常用的方法包括：

1．在孵育液中加入非特異性酶的抑制劑，除去不相關的酶反應。

2．選擇特異性較強的專一底物。

3．選擇酶的zui適pH，如酸性磷酸酶和堿性磷酸酶雖然作用底物相同，但是，兩者的zui適pH不同，所以通過選擇zui適pH可獲得較特異的酶反應。

三、捕捉反應

電鏡酶組織化學常用的捕捉反應為金屬鹽沉淀法和嗜鋨性物質生成法兩種。

1．金屬鹽沉淀法  其原理是使酶反應所生成的易溶性初級反應產(chǎn)物與重金屬結合，形成難溶的終產(chǎn)物，即高電子密度的沉淀物。常用的重金屬有鉛、銅、鋇和鈰等。

2．嗜鋨性物質生成法  基本原理是使酶反應產(chǎn)生嗜鋨性終產(chǎn)物，后者經(jīng)OsO4 固定，形成高電子密度的鋨黑，電鏡下容易識別。

電鏡酶組織化學結果的判斷應從細胞超微結構、反應產(chǎn)物電子密度的強弱、分布定位是否準確等方面綜合分析。良好的染色應該是酶細胞化學反應產(chǎn)物的定性、定位明顯而準確，電子密度均勻、顆粒細密。如果出現(xiàn)定位不準確或反應產(chǎn)物不同程度的彌散，則為人工假象．需盡力避免。