脫片問題

Poly-L-Lysine(多聚賴氨酸)為目前免疫組化染色工作中zui常用的一種防脫片劑，6ml的多聚賴氨酸溶液可按1:10稀釋成60ml的工作液，適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如不行，可用雙重處理（APES和Poly-L-Lysine）的切片。在以上兩種條件都行不通的情況下，可用如下方法：切片在脫蠟前，放在APES 1:50 丙酮溶液中浸泡3分鐘，晾干，即可進(jìn)行下一步。抗體

滅活內(nèi)源性酶

（1）HRP系統(tǒng)：3%雙氧水滅活

（2）AP系統(tǒng)：3%HAc滅活。

暴露抗原

對于石蠟切片的免疫組化實(shí)驗(yàn)時，必須采用高溫加熱抗原修復(fù)，這將有助于暴露抗原決定簇，從而增加免疫組化染色的強(qiáng)度(不同抗體的*修復(fù)液請參閱抗體說明書)。對于不同的組織，不同的抗原，不同的抗體，所采用的方法應(yīng)不一樣，可進(jìn)行熱修復(fù)、*消化、既不修復(fù)也不消化。膠原還可以用*消化等。

封閉

在山羊血清封閉，非特異性染色仍然較強(qiáng)時，可延長封閉時間或用濃縮血清封閉