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技術(shù)文章

間接凝集實驗原理詳細(xì)說明

閱讀:382發(fā)布時間:2015-12-28

一、原理

    可溶性抗原(或抗體)吸附于免疫學(xué)反應(yīng)無關(guān)的顆粒(稱為載體)表面上,當(dāng)這些致敏的顆粒與相應(yīng)的抗體(或抗原)相遇時,就會產(chǎn)生特異性的結(jié)合,在電解質(zhì)參與下,這些顆粒就會發(fā)生凝集現(xiàn)象。這種借助于載體的抗原抗體凝集現(xiàn)象就叫做間接凝集反應(yīng)(Indirect agglutination reaction)。

    載體的存在使反應(yīng)的敏感性得以大大提高。間接凝集反應(yīng)的優(yōu)點為:①敏感性強:間接凝集反應(yīng)是zui敏感性的血清學(xué)反應(yīng)方法之一,可以檢測到微量的抗體和抗原;②快速:一般1h~2h即可判定結(jié)果,若在玻板上進(jìn)行,則只需幾分鐘;③特異性強;④使用方便、簡單。

二、載體

    具有吸附抗原(或抗體)的載體很多,如聚苯乙烯乳膠、白陶土、活性炭、人和多種動物的紅血球、某些細(xì)菌等。

良好載體有如下幾點基本要求:

①在生理鹽水或緩沖液無自凝傾向;

②大小均勻;

③比重與介質(zhì)相似,短時間內(nèi)不能沉淀;

④無化學(xué)或血清學(xué)活性;

⑤吸附抗原(或抗體)后,不影響其活性。

    目前應(yīng)用zui廣的是人的O型紅血球和綿羊紅血球。而后者應(yīng)用更廣,因為其來源方便。另外綿羊紅血球的表面有大量的(約1000個以上)糖蛋白受體,極易吸附某些抗原物質(zhì),吸附性能好,且大小均勻一致。

三、間接凝集的分類

1、根據(jù)載體的不同,可分為間接炭凝、間接乳膠凝集和間接血凝等。

2、根據(jù)吸附物不同可分為間接凝集反應(yīng)(吸附抗原)和反向間接凝集反應(yīng)(吸附抗體)。

3、根據(jù)反應(yīng)目的不同,又可分為間接凝集抑制反應(yīng)和反向間接凝集抑制反應(yīng)。

4、根據(jù)用量和器材的不同又可分為試管法(全量法)、凹窩板法(半微量法)和反應(yīng)板法(微量法)。

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