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江蘇菲亞生物科技有限公司


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江蘇菲亞在線解答浙一學院ELISA實驗問題

閱讀:65發(fā)布時間:2015-12-15

    今天是又是新的開始,新的一周從解答客戶難題開始。今天剛上班我司的王接到了浙一學院的王同學來,他說:我做了十多次的Elisa,能夠得到線性比較好的標準曲線,但是同樣濃度的標準品每次的OD值都不一致,樣品就更加慘不忍睹了,除了酶標板之外,其余封閉蛋白,抗體,抗體稀釋度,等等條件都已經更換過,但是問題還是沒能解決,懷疑是酶標板的問題。求教高手,有什么方法可以快速驗證酶標板的可靠性。
    王分析:elisa本身靈敏性很高,每次做出來的值不一樣很正常,特別是od值比較大的時候更是差別很大,但是只要不要偏差太大就好,一般偏差要求10%內吧,好的數(shù)據(jù)是3%內。首先要穩(wěn)定所有的條件,不同的條件下做的板子讀值不一樣很正常。在同樣條件下同批次的板子,如果測定不一樣,就是包被問題或者保護劑的問題,但這兩個都是各個試劑盒的機密,看看文獻里別人怎么做的。其次每次實驗的標曲上同一濃度樣品的OD值不一樣是很正常的,這與抗原抗體反應體系、作用時間、顯色時間等等一系列的因素有關。鑒定該ELISA體系是否可靠,zui關鍵的指標是加標回收率和稀釋線性,如果你懷疑的話可以做一下。一般來說,國外廠商的ELISA試劑盒是沒有問題的。同時你還要看一下說明書中ELISA試劑盒的靈敏度,如果你的樣品濃度低于該檢測下限,則無法檢測到,這是很正常的現(xiàn)象,并不是非要每個樣品都要測出值才可以。

    王同學非常感謝王的分析,他說這次實驗的試劑盒不是在你們公司買的,還有這么好的服務態(tài)度,下次如果還有需要沖你們的服務態(tài)度就在你們公司買了。我司主營Elisa試劑盒,公司人才濟濟,咨詢訂購我司試劑盒。

 


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