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上海一研生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第11年

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細(xì)胞培養(yǎng)
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支原體形態(tài)

時(shí)間:2016/5/13閱讀:1842
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(一)形態(tài)與結(jié)構(gòu)  
 
    支原體的大小為0.2~0.3um,可通過(guò)濾菌器,常給細(xì)胞培養(yǎng)工作帶來(lái)污染的麻煩。無(wú)細(xì)胞壁,不能維持固定的形態(tài)而呈現(xiàn)多形性。革蘭氏染色不易著色,故常用Giemsa染色法將其染成淡紫色。細(xì)胞膜中含量較多,約占36%,對(duì)保持細(xì)胞膜的完整性具有一定作用。凡能作用于的物質(zhì)(如二性霉素B、皂素等)均可引起支原體膜的破壞而使支原體死亡。  
 
   支原體基因組為一環(huán)狀以雙鏈DNA,分子量?。▋H有大腸桿菌的五分之一),合成與代謝很有限。  
 
   肺炎支原體的一端有一種特殊的末端結(jié)構(gòu)(terminal structure),能使支原體粘附于呼吸道粘膜上皮細(xì)胞表面,與致病性有關(guān)。  
 
(二)培養(yǎng)特性  
 
   營(yíng)養(yǎng)要求比一般細(xì)菌高,除基礎(chǔ)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)外還需加入10~20%人或動(dòng)物血清以提供支原體所需的。zui適pH7.8~8.0之間,低于7.0則死亡,但解脲脲原體zui適pH6.0~6.5。  
 
   大多數(shù)兼性厭氧,有些菌株在初分離時(shí)加入5%CO2生長(zhǎng)更好。生長(zhǎng)緩慢,在瓊脂含量較少的固體培養(yǎng)基上孵育2~3天出現(xiàn)典型的“荷包蛋樣”菌落:圓形(直徑10~16um),核心部分較厚,向下長(zhǎng)入培養(yǎng)基,周邊為一層薄的透明顆粒區(qū)。此外,支原體還能在雞胚絨毛尿囊膜或培養(yǎng)細(xì)胞中生長(zhǎng)。  
 
  繁殖方式多樣,主要為二分裂繁殖,還有斷裂、分枝、出芽等方式,蓋因缺乏細(xì)胞壁造成分裂時(shí)二個(gè)子細(xì)胞大小均所致。同時(shí),支原體分裂和其DNA復(fù)制不同步,可形成多核長(zhǎng)絲體。  
 
(三)生化反應(yīng)與分型  
 
   一般能分解葡萄糖的支原體則不能利用,能利用的則不能分解葡萄糖,據(jù)此可將支原體分為兩類(見(jiàn)表19-1)。解脲脲原體不能利用葡萄糖或,但可利用尿素作能源。  
 
   各種支原體都有特異的表面抗原結(jié)構(gòu),很少有交叉反應(yīng),具有型特異性。應(yīng)用生長(zhǎng)抑制試驗(yàn)(Growth inhibition test,GIT)、代謝抑制試驗(yàn)(Metabolic inhibition test,MIT)等可鑒定支原抗原,進(jìn)行分型。  

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