細胞劃痕實驗是觀察掌握細胞遷移實驗過程中細胞活動的重要實驗方法。

問題一：細胞劃痕實驗為什么這么重要

答：因為細胞劃痕實驗是觀察細胞遷移活動的重要技術(shù)手段，而且簡單快捷、經(jīng)濟實惠（劃重點)。

問題二：細胞劃痕實驗為什么一般選擇6孔板

答：因為6孔板大小適中，可保證有相當(dāng)距離的平直劃痕，便于觀察;當(dāng)然若是需要高通量初篩時，也可以用12或者24孔板。

問題三：為什么細胞接種密度要求過夜100%融合

答：如果過夜后細胞=沒有100%融合，雖然可以適當(dāng)延長培養(yǎng)時間，但因細胞密度已經(jīng)很大，所以細胞狀態(tài)會逐漸變差，后續(xù)細胞可能不遷移而是凋亡。

問題四：怎樣避免細胞增殖對細胞遷移實驗造成的假陽性結(jié)果

答：操作如下:

1、使用無血清或低血清培養(yǎng)基(<2%)可降低細胞增殖對實驗結(jié)果的影響。

2、一般認為24h為細胞的一個周期，在選取合適的時間點(6，12，24h)檢測劃痕寬度時，不要超過細胞一個周期的時間。

問題五：結(jié)果怎樣拍照

答：按照6孔板背后畫線的垂直方向劃痕，可以形成若干交叉點，劃痕一次與5條定位線相交，就有10個可固定監(jiān)測點，以解決了前后觀察時位置不固定的問題。

問題六：細胞不遷移怎么回事

答：避開細胞狀態(tài)的影響，需要考慮細胞自身的遷移能力，并非所有細胞都適合劃痕實驗。

問題七：結(jié)果統(tǒng)計中，細胞計數(shù)和統(tǒng)計面積那個好用

答：根據(jù)細胞劃痕實驗的實驗結(jié)果選擇。如果細胞遷移輪廊比較清晰，并且遷移數(shù)量不多，我們可以選擇細胞計數(shù)；但如果細胞數(shù)比較多，連片生長，那么統(tǒng)計面積比細胞計數(shù)的方式更簡便且客觀。

問題八：細胞劃痕技術(shù)有什么不足嗎

答：細胞劃痕實驗的不足主要包括：

1、適用的細胞類型范圍小，一是需要遷移強的細胞，而且對無血清的環(huán)境有較強的忍受力(至少24h)12h細胞凋廣就超過50%。

2、自身操作的實驗誤差，如劃痕距離不一致等。

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