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技術(shù)文章
*溶液的配制與消毒
點擊次數(shù):521 發(fā)布時間:2011-4-20
*的作用是使細胞間的蛋白質(zhì)水解從而使細胞離散。不同的組織或者細胞對*的作用反應(yīng)不一樣。*分散細胞的活性還與其濃度、溫度和作用時間有關(guān),在 pH 為 8.0 、溫度為 37℃ 時,*溶液的作用能力zui強。使用*時,應(yīng)把握好濃度、溫度和時間,以免消化過度造成細胞損傷。因 Ca2+ 、 Mg2+ 和血清、蛋白質(zhì)克降低*的活性,所以配制*溶液時應(yīng)選用不含 Ca2+ 、 Mg2+ 的 BSS ,如: D-Hanks 液。終止消化時,可用含有血清培養(yǎng)液或者*抑制劑終止*對細胞的作用。
1. 稱取*:按*液濃度為 0.25 %,用電子天平準(zhǔn)確稱取粉劑溶入小燒杯中的雙蒸水(若用雙蒸水需要調(diào) PH 到 7.2 左右)或 PBS ( D-hanks )液中。攪拌混勻,置于 4℃ 內(nèi)過夜。
2. 用注射濾器抽濾消毒:配好的*溶液要在超凈臺內(nèi)用注射濾器( 0.22 微米微孔濾膜)抽濾除菌。然后分裝成小瓶于 -20℃ 保存以備使用。