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技術(shù)文章

蛋白去甲基化酶研究獲進展

點擊次數(shù):1097 發(fā)布時間:2011-6-10

PcG介導(dǎo)的組蛋白H3第27位賴氨酸上*基化(H3K27me3)在基因沉默和發(fā)育調(diào)控中起著至關(guān)重要的作用。小鼠胚胎干細胞中超過10%的基因受該種修飾調(diào)控,擬南芥中超過7,000個基因受該修飾調(diào)控。擬南芥中H3K27me3主要由CLF和SWN兩個甲基轉(zhuǎn)移酶催化,并招募LHP1結(jié)合以有效抑制基因表達。在哺乳動物中H3K27me3修飾是可逆的,但植物中并不存在哺乳動物中H3K27me3去甲基化酶KDM6的直系同源物。此前有研究表明,擬南芥中H3K27me3甲基化也是可以被主動去除的,因此揭示H3K27me3去甲基化的分子機制是植物表觀遺傳學研究中的一個重要科學問題。

對植物組蛋白去甲基化酶基因功能分析。建立了植物細胞內(nèi)組蛋白去甲基化酶活性檢測體系,通過該體系發(fā)現(xiàn)擬南芥REF6/JMJ12可以特異性地去除H3K27雙甲基化和*基化修飾。過表達REF6的植物與H3K27me3功能異常突變體具有相似的表型。同時ref6可以部分回復(fù)clf的表型,表明REF6和H3K27me3甲基轉(zhuǎn)移酶起著相互拮抗的作用。通過H3K27me3抗體進行染色質(zhì)免疫共沉淀結(jié)合大規(guī)模測序分析鑒定了數(shù)百個基因H3K27me3水平上升,這些基因多數(shù)是REF6的靶基因,參與植物發(fā)育以及對各種刺激響應(yīng)等多種生物學過程。轉(zhuǎn)錄組分析表明,這些基因上H3K27me3水平上升與其轉(zhuǎn)錄抑制呈正相關(guān)。

 

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