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瑞氏染液的配制
點擊次數(shù)：1186 發(fā)布時間：2011-8-25
（1） 瑞氏染液配制：
瑞氏染料 830gm或1g 甲醇（AR）500ml或600ml
a.先稱干燥（事先放入溫箱干燥過夜）瑞氏染料放置乳缽內(nèi)，用乳棒輕輕敲碎染料成粉末，再行研磨至聽不到研芝麻聲即呈細粉末，加少許甘油或甲醇溶解研磨，使染料在乳缸內(nèi)顯“一面鏡”光澤，而無染料粉粒沉著。
b.再加較多量甲醇研磨呈一面鏡光亮，靜置片刻，將上層液體倒入一清潔儲存瓶內(nèi)（用甲醇空瓶），再加甲醇研磨，重復數(shù)次，至乳缽內(nèi)染料及甲醇用完為止，搖勻，密封瓶口。
c.存室溫暗處，儲存愈久，則染料溶解、分解就越好，一般儲存3個月以上為佳。
（2） 緩沖液的配制：
（pH6.4~6.8，弱酸性）：
配方1 ： 配方2：1% KH2PO4 30ml M/15 KH2PO4 73.5 ml 1% Na2HPO4 20ml M/15 Na2HPO4 26.5ml
H2O（新鮮） 加至1000ml
置室溫黑暗處，瓶口密封，防止霉菌污染，如有污染則應報廢。
姬姆薩（Giemsa's stain；天青-伊紅）染色
1．姬姆薩染料是伊紅（AzurII Eqsin）和天青（藍）2號合成的。
2．姬姆薩染料（ Giemsa, 天青-伊紅）染液配制：
姬姆薩染料（粉末） 0.5g或7.5g 甲醇（AR） 33ml 或500ml 甘油（AR） 33ml或 500ml
a.先將姬姆薩染料放入乳缽中，逐漸倒甘油研磨溶于甘油中，置于56℃水溫箱內(nèi)，90～120分鐘，然后加入甲醇，搖勻后放置數(shù)天，過濾后或不過濾即可使用。此染液放置室溫陰暗處，時間越長越好。
b.使用染液可臨時配置）：姬姆薩染液1ml，加DDH2O10ml混勻。即可使用。
（3）緩沖液作用：
a.染色對氫離子濃度是十分敏感的，據(jù)觀察pH值的改變，可使蛋白質(zhì)與染料形成的化合物重新離解。
b.緩沖液須保持一定的pH使染色穩(wěn)定，PBS的pH 一般在6.4~6.8，
c.偏堿性染料可與緩沖液中酸基起中和作用，偏酸性染料則與緩沖液中的堿基起中和作用，使pH恒定。