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技術(shù)文章

*檢測(cè)試劑盒的檢測(cè)步驟

點(diǎn)擊次數(shù):543 發(fā)布時(shí)間:2011-9-14

名稱:*檢測(cè)試劑盒

適用范圍
可定性、定量檢測(cè)動(dòng)物組織(雞、豬、牛等)、牛奶、蜂蜜和雞蛋樣本中的*代謝物的殘留量。
 

提供的材料與試劑
1、96孔酶標(biāo)板×1塊(包被有偶聯(lián)抗原)
2、標(biāo)準(zhǔn)液×6瓶:(1ml/瓶)
0ppb,0.05ppb,0.15ppb,0.45ppb,1.35ppb,4.05ppb 3、高濃度標(biāo)準(zhǔn)品:(1ml/瓶) 100ppb
4、酶標(biāo)二抗?jié)饪s液 1.5ml

5、抗體濃縮液 0.8ml

6、底物液 A 液 7ml

7、底物液 B 液 7ml

8、終 止 液 7ml

9、20×濃縮洗滌液 40ml

10、2×濃縮復(fù)溶液 50ml

11、2-硝基苯甲醛 15.1mg

操作步驟:
1、將所需試劑從冷藏環(huán)境中取出,置于室溫(20-25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數(shù)量的微孔板,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
5、抗體工作液的稀釋:將抗體濃縮液用復(fù)溶工作液按照1:10體積比進(jìn)行稀釋(1份抗體濃縮液加入10份復(fù)溶工作液)。
6、加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本:加標(biāo)準(zhǔn)品/樣本50ml到對(duì)應(yīng)的微孔中,然后加入抗體工作液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min。
7、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內(nèi)液體甩干,用洗滌工作液(見(jiàn)配液7)250ml/孔,充分洗滌4-5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過(guò)的槍頭戳破)。
8、酶標(biāo)二抗工作液的稀釋:將酶標(biāo)二抗?jié)饪s液用復(fù)溶工作液按照1:10體積比進(jìn)行稀釋(1份酶標(biāo)二抗?jié)饪s液加入10份復(fù)溶工作液)。
9、加酶標(biāo)二抗:加入酶標(biāo)二抗100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)30min,取出重復(fù)洗板步驟7。
10、顯色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環(huán)境中反應(yīng)15min(見(jiàn)注意事項(xiàng)8)。
11、測(cè)定:加入終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設(shè)定酶標(biāo)儀于450nm處(建議用雙波長(zhǎng)450/630nm檢測(cè),請(qǐng)?jiān)?min內(nèi)讀完數(shù)據(jù)),測(cè)定每孔OD值。(若無(wú)酶標(biāo)儀,則不加終止液用目測(cè)法可進(jìn)行判定)。
 

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