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大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒

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具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號F01496

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所在地上海市

更新時間:2017-12-15 07:42:48瀏覽次數(shù):191次

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大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒 實驗?zāi)康模簻y定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中的含量(性質(zhì))。

大鼠內(nèi)皮素1(ET-1)ELISA試劑盒

實驗原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)水平。用純化的大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入內(nèi)皮素 1(ET-1)再與 HRP標記的 ET-1抗體結(jié)合,形成抗體 -抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物 TMB顯色。TMB在 HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)呈正相關(guān)。用酶標儀在 450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠內(nèi)皮素 1(ET-1)濃度。

樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。檢測細胞內(nèi)的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

檢測范圍:

5μg/L -150μg/L

保存條件及有效期:
1     2-8℃。
2     6個月 
五.標本的保存:

2-8度下可以保存一周時間,-20度可以保存1個月左右。-80度可以保存1年以上。-196度可以保存10年以上。

注意事項:

1. 在收集標本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。

 2.建議新鮮標本盡早檢測,對收集后及時進行檢測。1-3天左右檢測的樣本可儲存在4℃?zhèn)溆?。如有特殊原因需要周期性收集標本,請將標本及時分裝后放在-20℃或- 70℃條件下保存,避免反復(fù)凍融。

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