免疫組化染色前處理技術操作規(guī)范

時間：2017/4/18閱讀：290

1．金標檢測試劑盒取材：理想的取材厚度是0.2cm～0.3cm，大多數(shù)實驗室都認為組織在加熱抗原修復過程中造成脫片的主要原因是取材過厚或脫水浸蠟處理不當所致。良好的取材、固定、脫水過程是免疫組化質(zhì)控的前提，如果H&E切片都做不出滿意的染色結果，那么免疫組化染色也將無從談起，根本無法保證染色質(zhì)量。
2．固定：在眾多的組織固定液中（如甲醛、乙醇、戊二醛、多聚甲醛等），金標檢測試劑盒不同的實驗方法在使用上各有千秋。但在保持組織細胞結構的完整性、抗原可測定性、組織滲透性以及試劑的價格上，福爾馬林是、既經(jīng)濟又通用。而含酸或含汞的固定液對抗原保存均不理想。組織離體后固定一般不要超過30分鐘，在常溫條件下固定時間為8-24小時。同時還要注意避免福爾馬林過度固定造成的組織抗原丟失，有研究發(fā)現(xiàn)新鮮組織經(jīng)過福爾馬林一周固定后組織抗原丟失嚴重，抗原幾乎不能被檢測，因為組織固定后會引起蛋白或蛋白分子之間形成交聯(lián)，導致抗原位點遮蓋，可以通過抗原修復方法來修正，若加抗體前不采用抗原修復，則免疫組化染色常不能到達理想結果或不成功。組織同樣不能長時間放置在70%的乙醇中，酒精固定后的組織形態(tài)不如福爾馬林固定的組織。脫鈣液對抗原破壞較為嚴重，因此在組織脫鈣前在福爾馬林液中固定48小時，若組織沒有固定透則酸會破壞抗原，脫鈣液中酸的濃度與脫鈣時間都必須盡量控制在zui低的限度金標檢測試劑盒。

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