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ELISA試劑盒
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大鼠elisa檢測試劑盒實(shí)驗(yàn)抗體的制備方法

時(shí)間:2017/9/7閱讀:398
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大鼠elisa檢測試劑盒途徑的選擇決定于抗原的生物學(xué)特性和理化特性,如激素、酶、毒素等生物學(xué)活性抗原,通常不宜選用靜脈打針。
不一樣個(gè)別對共同抗原的反應(yīng)性不一樣,而且不一樣抗原發(fā)作免疫反應(yīng)的能力也有強(qiáng)有弱,因此常常在打針抗原的一起,參與能增強(qiáng)抗原的抗原性物質(zhì),以影響機(jī)體發(fā)作較強(qiáng)的免疫反應(yīng),這種物質(zhì)稱為免疫佐劑。
免疫前取等容積*或不*佐劑與免疫原溶液混合,用振蕩器混勻成乳狀,也可以在免疫前取需求量佐劑置乳缽中研磨,均勻后再邊磨邊滴參與等容積抗原液(其中加卡介苗3~4mg/ml或不加),加完后再繼承研磨成乳劑,滴于冰水上5~10min內(nèi)*不分散停止。
交叉反應(yīng)率低,標(biāo)明抗血清的特異性好,反之則特異性差。
收集的血液置于室溫下1h支配,凝聚后,置4℃下,過夜(切勿冰凍)分出血清,離心,4000rpm,10min。
取兔血有兩種方法,一是耳緣靜脈或耳動(dòng)脈放血,二是頸動(dòng)脈入血,也可心臟采血。加強(qiáng)免疫時(shí)用不*佐劑,初度免疫時(shí)皮下打針百日咳疫苗0.5ml,加強(qiáng)免疫時(shí)不必打針百日咳疫苗。
在無菌條件,吸出血清,分裝(0.05~0.2ml),貯于-40℃以下冰箱,或凍干后儲存。
取動(dòng)脈或靜脈放血時(shí),將兔放入一個(gè)特造的木匣或籠內(nèi),耳露于箱(籠)外,也可由另一人捉住兔身。
避免丟掉抗原,亦可用一打針器裝抗原液,另一打針器裝佐劑,二者以聚乙烯塑料管聯(lián)接,然后二者往復(fù)重復(fù)抽吸,約數(shù)十分鐘后即能*乳化。
每2~3周加強(qiáng)免疫一次。
制作方法:按比例將羊毛脂與石蠟油置容器內(nèi),用超聲波使之混勻,高壓滅菌,置4℃下保留備用。
大鼠elisa檢測試劑盒特異性是以交叉反應(yīng)率來標(biāo)明的。
交叉反應(yīng)率通常是用比賽抑制曲線來判定的。
若用兔,用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~3kg為宜。
家兔是zui常用以發(fā)作抗體的動(dòng)物,因此這兒首要談?wù)撏醚氖占?br />頸動(dòng)脈放血時(shí),將兔仰臥,固定于兔臺,剪去頸部的毛,切開皮膚,顯露頸動(dòng)脈,插管,放血。
不一樣濃度的抗原和近似抗原物質(zhì)分別做比賽抑制曲線,計(jì)算各自的聯(lián)絡(luò)率(B/T或B/B0),求出各清閑IC50時(shí)的濃度,按下列公式計(jì)算交叉反應(yīng)率。二禮拜后,可在另一耳放血。
常春藤皂苷元    465-99-6    20mg    Hederagenin
苯甲酰烏頭原堿    466-24-0    10mg    Benzoylaconine
雪上一枝蒿乙素    466-26-2    20mg    Bullatine B
茶黃素    4670-05-7    20mg    Theaflavin
??录獙?nbsp;   467-55-0    20mg    Hecogenin
異土木香內(nèi)酯    470-17-7    20mg    Isoalantolactone
華蟾毒精    470-37-1    20mg    Cinobufagin
桉葉油醇    470-82-6    20mg    Cineole
甘草次酸; beta-甘草亭酸    471-53-4    20mg    Glycyrrhetinic acid
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