小鼠白蛋白(ALB)試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標本中小鼠白蛋白(ALB)水平。用純化的小鼠白蛋白(ALB)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白蛋白(ALB),再與HRP標記的白蛋白(ALB)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白蛋白(ALB)呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中小鼠白蛋白(ALB)濃度。
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應(yīng)盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,小鼠白蛋白(ALB)試劑盒因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟
標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
480μg/L
5號標準品
150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液
240μg/L
4號標準品
150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液
120μg/L
3號標準品
150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液
60μg/L
2號標準品
150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液
30μg/L
1號標準品
150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液
小鼠白蛋白(ALB)試劑盒