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更新時(shí)間:2024-08-30 16:03:06瀏覽次數(shù):1089次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 環(huán)保在線貨號(hào) | CS-C8119 | 貨期 | 1~3天 |
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規(guī)格 | 50管/24樣 | 用途 | 僅供科研研究實(shí)驗(yàn) |
谷草轉(zhuǎn)氨酶(GOT)測(cè)試盒(可見分光光度法)
商品屬性:
貨號(hào) | 規(guī)格 | 貨期 | 英文名稱 |
CS-C8119 | 50管/24樣 | 1~3天 |
商品介紹:
測(cè)定原理:
GOT催化 α-同戊二酸和天門冬氨發(fā)生轉(zhuǎn)氨基反應(yīng),生成谷氨和草酰乙酸,草酰乙酸進(jìn)一步自行脫羧生成丙酮酸;丙酮酸可與2,4-二硝基肼反應(yīng)生成2,4-二硝基腙,在堿性條件下顯棕紅色;測(cè)定505nm吸光度的變化,即可計(jì)算GOT酶活力。
需自備的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL玻璃比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
步驟和注意事項(xiàng):?
準(zhǔn)備實(shí)驗(yàn)環(huán)境:?確保實(shí)驗(yàn)區(qū)域清潔,?使用酒精清潔計(jì)數(shù)板和蓋玻片,?然后用吸水紙輕輕擦干。?
細(xì)胞培養(yǎng):?
準(zhǔn)備試管或培養(yǎng)皿、?細(xì)胞培養(yǎng)基和待培養(yǎng)的細(xì)胞。?
取出保存于低溫下的細(xì)胞苗,?并加入培養(yǎng)基中,?搖晃混合均勻。?
用移液管將細(xì)胞培養(yǎng)基和細(xì)胞種植在試管或培養(yǎng)皿中。?
將試管或培養(yǎng)皿放置于恒溫培養(yǎng)箱中,?定期更換培養(yǎng)液。?
細(xì)胞凍存與復(fù)蘇:?
細(xì)胞系的凍存是將生長(zhǎng)較好的傳代細(xì)胞懸浮在加有冷凍保護(hù)劑的溶液中,?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度,?并在此溫度下對(duì)其長(zhǎng)期保存的過程。?
復(fù)蘇則是將凍存的細(xì)胞系恢復(fù)到常溫的過程,?原則是“慢凍快融",?以較大限度地保存細(xì)胞活力。?
細(xì)胞計(jì)數(shù):?
制備細(xì)胞懸液,?使用消化單層培養(yǎng)細(xì)胞或收集懸浮培養(yǎng)細(xì)胞,?制成單個(gè)細(xì)胞懸液。?
在顯微鏡下,?用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格中的細(xì)胞數(shù),?細(xì)胞壓中線時(shí),?只計(jì)左側(cè)和上方者,?不計(jì)右側(cè)和下方者。?
熒光顯微鏡使用:?
使用熒光染料對(duì)細(xì)胞進(jìn)行染色,?并觀察細(xì)胞所發(fā)出的熒光信號(hào),?以研究細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能。?
聚合酶鏈反應(yīng)(?PCR)?:?
準(zhǔn)備PCR反應(yīng)所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?
按照PCR反應(yīng)液配制表制備反應(yīng)液。?
在反應(yīng)器中加入反應(yīng)液,?開始PCR反應(yīng)。?
PCR反應(yīng)的成功與否,?可以通過電泳、?測(cè)序等方法進(jìn)一步確認(rèn)。?
轉(zhuǎn)染:?
準(zhǔn)備轉(zhuǎn)染所需的載體DNA和細(xì)胞。?
制備轉(zhuǎn)染試劑,?將DNA載體溶解于轉(zhuǎn)染試劑中,?與細(xì)胞混合均勻。?
處理轉(zhuǎn)染細(xì)胞,?并進(jìn)行下一步實(shí)驗(yàn)。?
在操作過程中,?應(yīng)注意實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范,?避免隨意丟棄垃圾,?及時(shí)登記購(gòu)買耗材或試劑,?保持實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔和安全
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