人中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白

產(chǎn)品名稱：中性粒細(xì)胞彈性蛋白酶(NE)重組蛋白

英文名稱：Recombinant Neutrophil Elastase (NE)

ELANE; HLE; HNE; ELA2; PMN-E; Neutrophil Elastase; Medullasin; Polymorphonuclear Leukocyte Elastase; Bone Marrow Serine Protease; Human Leukocyte Elastase; PMN Elastase

型號(hào)：CS-D111

酶與激酶

感染免疫

物種：Homo sapiens (Human，人)

來(lái)源：原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平：<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位：：分泌

預(yù)測(cè)分子量：53.3kDa

實(shí)際分子量：53kDa(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書)

片段與標(biāo)簽：Ile30~Gln247 with N-terminal His and GST Tag

緩沖液成份：20mM Tris, 150mM NaCl緩沖液，（pH8.0,含有1mM EDTA, 1mM DTT, 0.01%skl, 5% Trehalose and Proclin300）

性狀：凍干粉

純度：> 97%

等電點(diǎn)：8.7

應(yīng)用：Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格：10μg50μg200μg1mg5mg

蛋白方法/步驟：

一、其中碳?xì)浔谎趸癁槎趸己退莩觯鞍踪|(zhì)中的氮轉(zhuǎn)化為氨與硫酸結(jié)合生成硫酸氯在硫酸中，然后加堿蒸餾，使氨逸出，用硼酸吸收，再以硫酸或鹽酸標(biāo)準(zhǔn)溶液滴定。根據(jù)酸的消耗量乘以換算系數(shù)為蛋白質(zhì)含量。筆者根據(jù)多年來(lái)操作經(jīng)驗(yàn)認(rèn)為，
在檢驗(yàn)過(guò)程中應(yīng)注意如下三個(gè)環(huán)節(jié)。一、樣品、試劑加入量的控制。
二、1．稱取試樣的多少取決于樣品中蛋白質(zhì)的高低。蛋白質(zhì)中含氮量較恒定，通常是通過(guò)測(cè)定食品中氮的含量來(lái)確定蛋白質(zhì)的含量。一般固體樣品稱取0．2-2．0g，半固體樣品稱取2—5g，液體樣品吸取10-20ml。樣品中含氮量低的可增加稱樣量。
三、2．硫酸的加入量，通常加20ml，但試樣量如超過(guò)5g時(shí)，應(yīng)按每克試樣5ml的比例增加硫酸用量。否則試樣消化不造成結(jié)果偏低。3．消泡劑的加入。含脂肪或糖較多的食品在消化時(shí)產(chǎn)生大量泡沫，溢出瓶外，造成氮的損失，所以消化前可加入少量消泡齊lj。如：液體石蠟、硅消泡劑等。
四、4．催化劑的加入量要適宜硫酸銅是的催化劑，效果好，價(jià)格便宜，環(huán)境污染小，而且是蒸餾加堿時(shí)的指示劑。硫酸鉀可加快有機(jī)物的分解，使硫酸沸點(diǎn)從34．0℃提高到40．0℃以上，但加入量不能太大，否則溫度過(guò)高會(huì)使銨鹽分解而文——胡惠敏造成損失，除硫酸鉀外硫酸鈉也有同樣作用。5．難消化的樣品還可適當(dāng)加入少量過(guò)氧化氫，次氯酸鈉等氧化劑加速有機(jī)物氧化。

五、二、樣品消化處理。1．樣品一定要移入干燥的凱氏燒瓶中，否則樣品易粘在瓶壁上不易消化。加硫酸時(shí)應(yīng)將附在瓶壁上的粉末仔細(xì)洗至瓶中，使樣品全部消化。還有在消化時(shí)注意轉(zhuǎn)動(dòng)凱氏燒瓶，利用冷凝酸液將附在瓶壁上的碳粒沖下促進(jìn)消化。2．樣品與試劑加入搖勻后瓶口應(yīng)放一小漏斗，將瓶?jī)A斜45。角斜至有小孔的石棉網(wǎng)上，小心加熱，避免噴濺。待瓶?jī)?nèi)試樣全部碳化，泡沫停止后，再加強(qiáng)火力，并保持瓶?jī)?nèi)液體微沸，至液體呈澄清透明的藍(lán)綠色后再加熱半小時(shí)，樣品即消化。三、蒸餾過(guò)程中條件的控制。

蛋白實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)：

1、樣本處理：

采樣、存儲(chǔ)和處理樣本要規(guī)范，避免凍融循環(huán)。防止樣本污染，保持樣本的純度。

2、樣本分離和制備：

使用合適的分離方法，如SDS-PAGE或液相色譜。保持儀器和試劑的干凈，防止污染。

3、樣本標(biāo)記和標(biāo)準(zhǔn)化：

選擇合適的蛋白質(zhì)標(biāo)記方法，確保標(biāo)記效率和穩(wěn)定性。

4、質(zhì)譜分析：

確保質(zhì)譜儀和其他相關(guān)設(shè)備的校準(zhǔn)和性能處于狀態(tài)，并保持質(zhì)譜分析條件的一致

5、數(shù)據(jù)處理和分析：

峰提取、質(zhì)譜校準(zhǔn)和蛋白質(zhì)定量要仔細(xì)進(jìn)行，使用專業(yè)工具。使用統(tǒng)計(jì)學(xué)方法分析數(shù)據(jù)，進(jìn)行多重假設(shè)校正。

6、技術(shù)重復(fù)和質(zhì)量控制：

進(jìn)行技術(shù)重復(fù)，包括陽(yáng)性和陰性對(duì)照組。確保實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。

下面是公司現(xiàn)貨出售產(chǎn)品：