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上海研盟生物科技有限公司
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上海研盟生物科技有限公司優(yōu)質(zhì)提供“人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒",規(guī)格48T/96T,提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),有任何質(zhì)量問(wèn)題或是檢測(cè)不出實(shí)驗(yàn)結(jié)果均可免費(fèi)退換,:.
ELISA試劑盒提供免費(fèi)檢測(cè)服務(wù),我們將根據(jù)實(shí)驗(yàn)工作量和難易程度,雙方協(xié)定實(shí)驗(yàn)周期,保質(zhì)保量完成委托實(shí)驗(yàn),只收取試劑盒的費(fèi)用,其他輔助試劑全部免費(fèi)。
【友情提示】:產(chǎn)品價(jià)格與說(shuō)明書請(qǐng)?zhí)砑? 在線詢價(jià),索要說(shuō)明書;
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【樣本儲(chǔ)存】:收集標(biāo)本前必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。對(duì)收集后當(dāng)天進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,將標(biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復(fù)凍融。部分激素類標(biāo)本需添加*。
供應(yīng)的種屬有:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、植物等ELISA試劑盒
1、產(chǎn)品種類齊全、質(zhì)量可靠、*、靈敏度高、效果穩(wěn)定、易保存、操作簡(jiǎn)單。
2、免費(fèi)提供產(chǎn)品報(bào)價(jià)、實(shí)驗(yàn)原理、產(chǎn)品用途及說(shuō)明書。
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產(chǎn)品介紹:
英文名稱:Human melanocyte antibody,MC Ab Elisa Kit
中文名稱:人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒
貨號(hào):BYS102393B
報(bào)價(jià)::
種屬:人
規(guī)格:96T/Kit(8*12 strips)、48T/Kit(8*6 strips)
檢測(cè)方法:雙抗夾心法、雙抗體一步夾心法
用途:本試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中待測(cè)物質(zhì)的含量。
有效期:6個(gè)月
保存條件:2-8℃
操作步驟
方法一 用于檢測(cè)未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被:用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡(jiǎn)稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔,陰性對(duì)照孔及陽(yáng)性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體:于各反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5~1小時(shí),洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。
5. 終止反應(yīng):于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深,陽(yáng)性程度越強(qiáng),陰性反應(yīng)為無(wú)色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“ "、“-"號(hào)表示。也可測(cè)O·D值:在ELISA檢測(cè)儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔O·D值,若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍,即為陽(yáng)性。
方法二 用于檢測(cè)未知抗體的間接法:
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,zui后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法"的4、5、6。
人黑色素細(xì)胞抗體(MC Ab)ELISA試劑盒檢測(cè)影響因素分析如下:
一、標(biāo)本的影響:溶血標(biāo)本及混有紅細(xì)胞的血清采用ELISA法檢測(cè)易產(chǎn)生假陽(yáng)性??赡苁侨苎逯泻羞^(guò)氧化酶物質(zhì)(紅細(xì)胞或血紅蛋白中的亞鐵血紅素),在洗滌過(guò)程中往往難以*洗脫,它可使H2O2釋放出原生態(tài)氧(O),從而催化底物四甲基聯(lián)苯胺生成可溶性的有色物質(zhì),即顯藍(lán)色,產(chǎn)生假陽(yáng)性[2]。所以嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。 標(biāo)本受細(xì)菌污染。因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過(guò)氧化物酶,因此,被細(xì)菌污染的標(biāo)本同溶血標(biāo)本一樣,亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測(cè)定結(jié)果。 標(biāo)本保存不當(dāng)。在冰箱中保存過(guò)久的標(biāo)本,在間接法ELISA測(cè)定中會(huì)導(dǎo)致本底過(guò)深、造成假陽(yáng)性;為克服上述干擾,ELISA試劑盒測(cè)定的血清標(biāo)本宜為新鮮采集;如不能立即測(cè)定,5 d內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可存放于4℃,1周后測(cè)定的血清標(biāo)本應(yīng)低溫凍存;凍存后融解的標(biāo)本,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混合后再測(cè)定,但混勻時(shí)應(yīng)輕柔,不可強(qiáng)烈振蕩。 塑料試管能吸附抗原物質(zhì),樣本久置在塑料管內(nèi)會(huì)使樣本內(nèi)抗原含量下降造成假陰性。使用真空*;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值,EDTA、酶抑制劑(如NaN3)可抑制ELISA系統(tǒng)中辣根過(guò)氧化物酶活性。 標(biāo)本凝固不全。 在工作中,有時(shí)為了爭(zhēng)取時(shí)間快速檢測(cè),常在血液還未開始凝固時(shí)即強(qiáng)行離心分離血清,使血清中仍殘留部分纖維蛋白原,在ELISA測(cè)定過(guò)程中可以形成肉眼可見的纖維蛋白塊,易造成假陽(yáng)性結(jié)果;因此血液標(biāo)本采集后必須使其充分凝固后再分離血清。
二、 試劑影響 ELISA試劑盒檢測(cè)試劑廠家較多;不同廠家出產(chǎn)的試劑
靈敏度與特異性存在一定的差別,使用質(zhì)劣的試劑必然導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性或假陰性。因此,選擇高質(zhì)量的上海研盟生物科技有限公司的ELISA試劑盒是保證結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵之一。
三、操作技術(shù)的影響:吸量不準(zhǔn)確,直接影響檢測(cè)結(jié)果。因此加樣器也要經(jīng)常清洗,定期校準(zhǔn)。
溫育影響:抗原抗體結(jié)合及酶促反應(yīng)對(duì)溫度有嚴(yán)格要求,酶標(biāo)板周圍與內(nèi)部孔升降溫速率不同,造成周邊與內(nèi)部孔結(jié)果差異;干浴與水浴存在明顯的差異,盡可能使用水浴,并要求固相板放入水中,減少受熱不均,貼密封膜,防止污物浸入。
加樣次序影響:有時(shí)我們?cè)诩訕舆^(guò)程中,常常會(huì)遇到個(gè)別標(biāo)本未離心等情況,為了節(jié)約時(shí)間,往往這時(shí)我們會(huì)先加酶結(jié)合物,然后等標(biāo)本分離好后再加標(biāo)本,這樣,竟常常會(huì)造成HBeAb和HBcAb的假陰性。因?yàn)镠BeAb和HBcAb都是競(jìng)爭(zhēng)抑制法,先加入酶標(biāo)記的抗體,首先與固相載體上的抗原結(jié)合,待加入顯色劑后,因酶的存在而顯色,故呈陰性[3]。
綜上所述,對(duì)臨床檢驗(yàn)ELISA測(cè)定中出現(xiàn)的假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果,要從多方面進(jìn)行分析除試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并采取相應(yīng)措施排除干擾作用。
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