亚洲国产精品二区久久,日本美女后入式午夜视频在线观看,国产污视频在线观看,欧美日韩国产精品中文字幕在线观看

江蘇菲亞生物科技有限公司
免費會員

細胞適應無血清培養(yǎng)基的方法

時間:2018/3/6閱讀:1037
分享:

直接適應——細胞從添加血清培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中。 
    一些類型細胞可直接從包含血清的培養(yǎng)基適應無血清培養(yǎng)基。對于直接適應,接種細胞密度應該:2.5×105~3.5×105細胞/ml。當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml時,傳代培養(yǎng)細胞。當細胞密度在培養(yǎng)47天后達到2×106~4×106細胞/ml時,細胞*適應了無血清培養(yǎng)基。每隔3~5天,當細胞密度達到1×106~3×106細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應該再次傳代培養(yǎng)。 
連續(xù)適應——分好幾步把細胞從添加血清的培養(yǎng)基轉換到無血清培養(yǎng)基(SFM)中,與直接適應相比較,連續(xù)適應趨向對于細胞更加溫和一些。 
1 2倍正常接種密度接種生長活躍的細胞培養(yǎng)物到75%有血清培養(yǎng)基:25SFM 混合培養(yǎng)基中,傳代培養(yǎng)。 
2 當細胞密度>5×105細胞/ml時,以2×1053×105細胞/ml細胞密度,在有血清培養(yǎng)基:SFM5050的混合培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。 
3 2×1063×106細胞/ml細胞密度,25%有血清培養(yǎng)基和75% SFM中傳代培養(yǎng)。 
4 當細胞密度達到1×1063×106細胞/ml(接種后46天),在100SFM培養(yǎng)基中傳代培養(yǎng)。 
5 每隔35天,當細胞密度達到1×1063×106細胞/ml,細胞活率在90%時,貯備的適應了無血清培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)物應該再次傳代培養(yǎng)。 
       建議備份前一次混合培養(yǎng)的培養(yǎng)物,直到每一次細胞適應了新的混合培養(yǎng)基。每一次減少血清前,可能需要在SFM/有血清混合培養(yǎng)基中進行幾次傳代。 
  在適應過程中,不要讓細胞生長過度。這將增加選擇亞群的可能性。需要注意,與有血清培養(yǎng)基相比,大部分SFM包含非常少的蛋白質,因而更易于受外界因素的影響。 
  細胞培養(yǎng)適應替代血清:許多細胞利用連續(xù)適應方法能很好的適應,用包含FBS的的培養(yǎng)基和包含有替代血清的培養(yǎng)基11vv)的混合培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞。通過下列的混合培養(yǎng)基的方式,連續(xù)幾代減少當前培養(yǎng)基的量:12,14,116100%替代培養(yǎng)基。每次適應改變血清比例時,傳代細胞23次。 
  培養(yǎng)可以直接從FBS轉換到替代血清。一開始就使用相同于FBS的濃度的替代物或血清,生長的延遲可能會發(fā)生,允許進行23次的傳代,使生長率恢復到以前的水平。 
  特別需要強調的是:配制無血清培養(yǎng)液必須使用高質量的水,如石英玻璃蒸餾器經三次蒸餾或超純水凈化裝置制備的水。因為無血清培養(yǎng)基缺乏了血清中天然成分中和毒素、保護細胞的大分子,既便水中的有毒物質含量甚微,也可能對細胞產生致死性損害。這是無血清培養(yǎng)能否成功的關鍵因素之一。

 

 

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

X
該信息已收藏!
標簽:
保存成功

(空格分隔,最多3個,單個標簽最多10個字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
在線留言
校花内射国产麻豆欧美一区| 大鸡巴操逼 公司| 差鸡巴没码在线观看| 麻豆91精品96久久久| 国产一区精品在线| 91啪国线自产2019| 黑人大鸡巴日小逼| 午夜精品福利一区二区三区蜜桃p| 欧美大鸡巴操穴日韩| 久久国产高清波多野结衣| 欧美高清一二三区| 国产妇女乱一性一交| 老女人爱精大鸡吧草| 日本 视频 一区二区| 亚洲av 又黄又爽十大| 阴茎大头插少妇蜜穴视频| 天天天天天干夜夜夜夜夜操| 国产福利一区二区精品秒拍| 日日狠狠久久888av| 国产熟女50岁一区二区| 大阴茎交于大阴户黄片视频| 爆操大奶子美女视频| 国产乱色国产精品免费播放| 日韩素人精品亚洲热一区| 三级片手机在线视频| 亚洲av 又黄又爽十大| 伊人久久丁香色婷婷啪啪| 大鸡巴插入阴道视频| 激烈18禁高潮视频免费| 精品的极品美女一区二区三区| 一区亚洲免费二区| 五月天亚洲激情综合av| 18岁以下禁看美女的胸| 麻豆国产欧美一区二区三区r| 国产三级精品久久久久| 啊啊啊男女激情插插视频| 中文国产成人精品久久久| 99视频在线看免费视频| 韩美国男人叉女人| 大鸡巴抽插小穴色虐视频| 中文字幕在线精品的视频|