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上海鈺博生物科技有限公司
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閱讀:167發(fā)布時(shí)間:2017-3-14
ELISA試劑盒各個(gè)操作步驟的留意關(guān)鍵
在運(yùn)用前與室溫平衡,再進(jìn)行測(cè)定。在ELISA試劑盒中通常有兩次抗原抗體反響,即加標(biāo)本和加酶物后。抗原抗體反響的完結(jié)需求有必定的溫度和時(shí)刻,這一保溫進(jìn)程稱(chēng)為溫育(incubation),有人稱(chēng)之為孵育,在ELISA試劑盒中似不恰當(dāng)。
ELISA試劑盒屬固相免疫測(cè)定,抗原、抗體的只在固相表面上發(fā)作。以抗體包被的夾心法為例,加入板孔中的標(biāo)本,其間的抗原并不是都有平等的和固相抗的時(shí)機(jī),只要zui靠近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體觸摸。
如果對(duì)試劑預(yù)備不太留意,在試驗(yàn)時(shí)將試劑從冰箱中拿出來(lái)即用,而疏忽了這種做法有也許影響后邊溫育時(shí)刻不夠的疑問(wèn)影響后邊的操作。測(cè)定中試劑的預(yù)備zui為要害的是,在試驗(yàn)開(kāi)始前,將試劑盒先從冰箱中拿出來(lái),在室溫下放置20min以上后,以使試劑盒
2. 當(dāng)混合蛋白溶液時(shí)應(yīng)盡量輕緩,防止起泡。
3. 洗刷進(jìn)程非常重要,不充分的洗刷易形成假陽(yáng)性。
4. 一次加樣時(shí)刻操控在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,引薦運(yùn)用排槍加樣。
5. 請(qǐng)每次測(cè)定的一起做規(guī)范曲線(xiàn),做復(fù)孔。
6. 如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高,請(qǐng)先稀釋后再測(cè)定。
7. 在制造規(guī)范品、檢查溶液工作液時(shí),請(qǐng)以相應(yīng)的稀釋液制造,ELISA試劑盒不能混雜。
8. 底物請(qǐng)避光保留。
9、ELISA試劑盒操控好每一步的操作時(shí)刻。
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