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江蘇菲亞生物科技有限公司
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酶聯(lián)免疫試驗(yàn)預(yù)備之*洗刷方法
2017-4-26 閱讀(672)
ELISA試劑盒剖析洗刷的方法除某些 ELISA 儀器配有特別的自動(dòng)洗刷儀外，手工操作有浸泡式和流水沖刷式兩種，進(jìn)程如下：
(1)浸泡式
a.吸干或甩干孔內(nèi)反響液；
b.用洗刷液過洗一遍(將洗刷液注滿板孔后，即甩去)；
c.浸泡，行將洗刷液注滿板孔，放置1-2 分鐘，間歇搖擺，浸泡時(shí)刻不行隨意縮短；
d.吸干孔內(nèi)液體。吸干應(yīng)*，可用水泵或真空泵抽吸，也可甩去液體后在清洗毛巾或吸水紙上拍干；
e.重復(fù)操作c 和d，洗刷3-4次(或按闡明規(guī)則)。在間接法中如本底較高，可增加洗刷次數(shù)或延伸浸泡時(shí)刻。微量滴定板多選用浸泡式洗刷法。洗刷液多為含非離子型洗刷劑的中性緩沖液。聚苯乙烯載體與蛋白質(zhì)的是疏水性的，非離子型洗刷劑既含疏水基團(tuán)，ELISA試劑盒也含親水基團(tuán)，其疏水基團(tuán)與蛋白質(zhì)的疏水基團(tuán)借疏水鍵，然后削弱蛋白質(zhì)與固相載體的，并借助于親水基團(tuán)和水分子的作用，使蛋白質(zhì)回復(fù)到水溶液狀況，然后脫離固相載體。洗刷液中的非離子型洗刷劑一般是吐溫 20，其濃度可在0.05%-0.2%
之間，高于0.2%時(shí)，可使包被在固相上的抗原或抗體解吸附而減低試驗(yàn)的靈敏度。
zui初用于小珠載體的洗刷，洗刷液僅為蒸餾水乃至可用自來水。洗刷時(shí)附接一特別設(shè)備，使小珠在流水沖擊下不斷地滾動(dòng)淋洗，持續(xù)沖刷 2 分鐘后，吸干液體，再用蒸餾水浸泡2 分鐘，吸干即可。浸泡式猶如盆浴，流水沖刷式則好比淋浴，其洗刷作用更為*，且也簡潔、快速。
已有試驗(yàn)標(biāo)明，流水沖刷式相同也適用于微量滴定板的洗刷。洗刷時(shí)設(shè)法加大水流量或加大水壓，讓水流沖擊板孔外表，洗刷作用更佳。
