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江蘇菲亞生物科技有限公司
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江蘇菲亞：適合ELISA試劑盒檢測樣本的方法
2018-8-23 閱讀(847)
血清是常用的ELISA試劑盒標本之一，ELISA檢測中血漿一般可視為與血清同等的標本，標本中干擾性物質(zhì)是引起檢測后結(jié)果偏高或偏低的主要原因，干擾性物質(zhì)分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩大類；由于各種人為原因引起的標本溶血，均可因紅細胞破壞溶解時釋放出大量具有過氧化物酶活性的血紅蛋白，在以辣根過氧化物酶為標記的 ELISA測定中，會導(dǎo)致非特異性顯色，干擾測定結(jié)果。
標本受細菌污染 ：因菌體中可能含有內(nèi)源性辣根過氧化物酶，因此，被細菌污染的標本同溶血標本一樣，亦可產(chǎn)生非特異性顯色而干擾測定結(jié)果。
標本保存不當 ：在冰箱中保存過久的標本，血清中IgG可聚合成多聚體、AFP可形成二聚體，在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、甚至造成檢測OD值偏高；
標本凝集不全：在ELISA檢測中影響血清血漿樣本的因素很多，ELISA試劑盒在考慮試劑因素和操作因素之外，也應(yīng)從標本因素方面進行分析。
常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補體、嗜異性抗體、嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。
類風(fēng)濕因子 ：血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）在ELISA檢測中，可與ELISA系統(tǒng)中的捕獲抗體及酶標記二抗的FC段直接結(jié)合，從而導(dǎo)致檢測OD值偏高。
補體 ： ELISA系統(tǒng)中固相一抗和標記二抗過程中，抗體分子發(fā)生變構(gòu)，其FC段的補體C1q分子結(jié)合位點被暴露出來，使C1q 可以將二者連接起來，從而造成檢測OD值偏高。
嗜異性抗體；人類血清中含有能與嚙齒類動物（如鼠等）Ig (s) 結(jié)合的天然嗜異性抗體，可將ELISA系統(tǒng)中一抗和二抗連接起來，也能造成檢測OD值偏高。
此外血清中嗜靶抗原自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig (s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)及血清中脂質(zhì)過高、ELISA試劑盒膽紅素、血紅蛋白及血液粘度過大等，均對ELISA測定結(jié)果有干擾作用。
