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江蘇菲亞生物科技有限公司
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三種方法助您評判免疫組化結果分析
2018-10-16 閱讀(4551)
免疫組化,是應用免疫學基本原理——抗原抗體反應,即抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑(熒光素、酶、金屬離子、同位素)顯色來確定組織細胞內(nèi)抗原(多肽和蛋白質(zhì)),對其進行定位、定性及相對定量的研究,稱為免疫組織化學技術(immunohistochemistry)或免疫細胞化學技術(immunocytochemistry)。
(1)陽性著色細胞計數(shù)法。在40*光鏡下,隨機選擇不重疊的10個視野,人工或機器計數(shù)陽性著色細胞,每組3~6張不同動物組織切片,然后進行組間比較即可。
(2)灰密度分析法。通過在不同組別和不同動物組織切片上選擇相同區(qū)域、相同條件下用image j進行灰密度分析,然后進行統(tǒng)計分析即可。
(3)評分法。通過在光學顯微鏡下對組織切片分別按染色程度(0~3分為陰性著色、淡黃色、淺褐色、深褐色)、陽性范圍進行評分(1~4分為0~25%、26~50%、51~75%、76~100%),終可以分數(shù)相加,再進行比較。
對于以上這幾種方法,各有利弊,請細心選擇。要想得到正確結果的前提是你要做出著色均勻、背景很淺的高質(zhì)量切片。