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ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品檢測(cè)要點(diǎn)分享
2018-11-27 閱讀(1228)
ELISA中，標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制與計(jì)算是整個(gè)實(shí)驗(yàn)流程的必要步驟，也是關(guān)鍵步驟之一。今天為大家?guī)?lái)了*ELISA標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品檢測(cè)要點(diǎn)分享，一起來(lái)看下吧：
1.樣品的濃度等指標(biāo)是根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算出來(lái)的，所以首先要把做標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)看作是比做正式實(shí)驗(yàn)還要重要的一件事，否則后面的實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)從談起。
2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣品的標(biāo)準(zhǔn)濃度范圍要有一個(gè)比較大的跨度，并且要能涵蓋你所要檢測(cè)實(shí)驗(yàn)樣品的濃度，即樣品的濃度要在標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)濃度范圍之內(nèi)，包括上限和下限。而對(duì)于呈s型的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)，盡量要使實(shí)驗(yàn)樣品的濃度在中間坡度陡段，即曲線(xiàn)幾乎成直線(xiàn)的范圍內(nèi)。
3.采用倍比稀釋法配制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)中的標(biāo)準(zhǔn)樣品濃度，這樣就能夠保證標(biāo)準(zhǔn)樣品的濃度不會(huì)出現(xiàn)較大的偏離。
4.檢測(cè)標(biāo)準(zhǔn)樣品時(shí)，應(yīng)按濃度遞增順序進(jìn)行，以減少高濃度對(duì)低濃度的影響，提高準(zhǔn)確性。
5.標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的樣品數(shù)一般為7個(gè)點(diǎn)，但至少要保證有5個(gè)點(diǎn)。
6.做出的標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒?yàn)要求不同而有所變動(dòng)，但一般來(lái)說(shuō)，相關(guān)系數(shù)r至少要大于0.98，對(duì)于有些實(shí)驗(yàn)，至少要0.99甚至是0.999。
