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血清鐵濃度測試盒（比色法）測定與注意事項
2023-11-20 閱讀(97)
血清鐵濃度測試盒（比色法）測定與注意事項：
一、測定：
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到520 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標準液解凍：提前取出標準液，置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管：取EP管，依次加入125 μL蒸餾水，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，依次加入125 μL標準液，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A標準管。
5. 測定管：取EP管，依次加入125 μL血清，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
血清鐵濃度計算公式：
血清鐵含量(μmol /dL)=[C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V總
=10 × (A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
C標準液：100 μmol/L Fe3+標準液；V總：標準液總體積1mL；1 dL=0.1 L。
二、注意事項：
1、血清鐵含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑只能當天使用。
3. 檢出限為1μmol/L。
1. 分光光度計/酶標儀預熱30 min，調(diào)節(jié)波長到520 nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標準液解凍：提前取出標準液，置于室溫下充分解凍后混勻。
3. 空白管：取EP管，依次加入125 μL蒸餾水，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿（自備），充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A空白管。
4. 標準管：取EP管，依次加入125 μL標準液，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A標準管。
5. 測定管：取EP管，依次加入125 μL血清，125 μL試劑一，125 μL試劑二，混勻后蓋緊，置于沸水浴5min，自來水冷卻。加入62 μL氯仿，充分震蕩混勻；室溫10000rpm，離心10min，小心吸取上層液210 μL，加入微量石英比色皿/96孔板，于520 nm測定吸光度，記為A測定管。
注意：空白管和標準管只需測定一次。
血清鐵濃度計算公式：
血清鐵含量(μmol /dL)=[C標準液×(A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)]×V總
=10 × (A測定管－A空白管)÷(A標準管－A空白管)
C標準液：100 μmol/L Fe3+標準液；V總：標準液總體積1mL；1 dL=0.1 L。
注意事項：
1、血清鐵含量少，所用器皿（EP管）需要注意，避免被鐵污染。
2、試劑一和試劑二溶液不穩(wěn)定，需現(xiàn)配現(xiàn)用，新配制的試劑只能當天使用。
3. 檢出限為1μmol/L。
