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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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微生物培養(yǎng)基配置步驟及注意事項(xiàng)
2024-4-28 閱讀(58)
培養(yǎng)基( culture medium)是人工配制的，適合微生物生長(zhǎng)、分離鑒別的營(yíng)養(yǎng)基礎(chǔ)。一般基礎(chǔ)培養(yǎng)基中古有蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化鈉、瓊脂等基本營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。微生物培養(yǎng)基應(yīng)用范圍很廣。例如，無(wú)菌試驗(yàn)培養(yǎng)基可檢查藥品、生物制品是否污染細(xì)菌，它直接關(guān)系到人民用藥安全；在臨床及食品衛(wèi)生檢驗(yàn)中常用選擇、鑒別培養(yǎng)基，此類(lèi)培養(yǎng)基中根據(jù)用途不同，需要加入抑菌劑、指示劑、血液、糖等試劑，以利于特定細(xì)菌的分離與鑒別，需要使細(xì)菌大量生長(zhǎng)、繁殖的各類(lèi)培養(yǎng)基；病毒培養(yǎng)及疫苗中則需用組織細(xì)胞培養(yǎng)液，主要成分為多種氨基酸、核苷酸、無(wú)機(jī)鹽、生長(zhǎng)因子等。配置微生物培養(yǎng)基需要
配置微生物培養(yǎng)基步驟：
1、準(zhǔn)確稱(chēng)量試劑：根據(jù)不同的菌類(lèi)和用途，選擇適宜的培養(yǎng)基，培養(yǎng)基所需試劑必須純凈。
2、校正pH值：將稱(chēng)量好的培養(yǎng)基各種成分放入容器內(nèi)，標(biāo)記劃線，加熱溶解，補(bǔ)充水分，測(cè)定酸堿度，常用pH6.8～8.0的精密試紙或酸度計(jì)測(cè)定。用1NNaOH和1N HCl調(diào)節(jié)pH值到適宜范圍內(nèi)。
3、過(guò)濾：將玻璃漏斗置鐵架上，再用紗布夾棉花或用濾紙放在漏斗中，將上述培養(yǎng)基倒入其中過(guò)濾至透明。
4、分裝：將過(guò)濾后的培養(yǎng)基分裝于中試管或三角瓶?jī)?nèi)(試管內(nèi)每支裝5mL;三角瓶中裝100～150ml)，塞好棉塞用牛皮紙包扎好，準(zhǔn)備滅菌。
5、滅菌：培養(yǎng)基的滅菌，常用高壓蒸汽滅菌法。一般微生物的營(yíng)養(yǎng)細(xì)胞在水中煮沸后即被殺死，但細(xì)菌的芽胞有較強(qiáng)的抗熱性，須經(jīng)高壓蒸汽滅菌才能達(dá)到*滅菌的目的。根據(jù)蒸汽溫度隨壓力升高而上升的原理，即壓力越大，蒸汽溫度就越高。因此，在同一溫度條件下，采用高壓蒸汽滅菌比干熱滅菌法效果要好。而且在濕熱情況下，菌體吸收水分后，其蛋白質(zhì)易于凝固變性，因?yàn)檎羝拇┩噶?qiáng)，殺菌效果好。
配置微生物培養(yǎng)基注意事項(xiàng)：
1、根據(jù)不同微生物的營(yíng)養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。
2、注意各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度及合適配比，保持合適滲透壓。
3、將培養(yǎng)基的 pH 控制在適宜的范圍之內(nèi)，以利于不同類(lèi)型微生物的生長(zhǎng)繁殖或代謝產(chǎn)物的積累。
4、要注意各種原料的配比，每種培養(yǎng)基的配比合適的配比，可以按照老師的要求去做。
5、如需要加熱的時(shí)候注意時(shí)間的把握。
