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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
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人胚腎細(xì)胞雙抗夾心法具體實(shí)驗(yàn)步驟
2018-3-26 閱讀(250)
人胚腎細(xì)胞雙抗夾心法具體實(shí)驗(yàn)步驟
首先*步是包被，用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃ 過夜。第二天，丟棄孔中的溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次洗滌3分鐘。
第二步是加樣，加一定稀釋的待檢樣品0.1ml到已包被的反應(yīng)孔中，置于37℃ 的溫度下孵育1小時(shí)。孵育完之后洗滌。
洗滌完之后需要做的是加酶標(biāo)抗體在各個(gè)反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體0.1ml。37℃ 孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
做完上個(gè)步驟，下面我們需要做的就是加底物液顯色，在各個(gè)反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃ 10～30分鐘。
實(shí)驗(yàn)即將完成即終止反應(yīng)，于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
實(shí)驗(yàn)的zui后一步即實(shí)驗(yàn)結(jié)果的判定，可在白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+"、“-"號(hào)表示。也可測(cè)OD值：在ELISA檢測(cè)儀上，于450nm處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測(cè)各孔OD值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
人胚腎細(xì)胞HAmEpiCL 人羊膜上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HVTL 人滋養(yǎng)層絨毛細(xì)胞裂解物 200 µg
HVMFL 人絨毛間葉成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HPA-v L 人前脂肪細(xì)胞-內(nèi)臟裂解物 200 µg
HPA-s L 人前脂肪細(xì)胞-皮下裂解物 200 µg
HMSC-bm L 人間充質(zhì)干細(xì)胞-骨髓裂解物 200 µg
HMSC-ad L 人間充質(zhì)干細(xì)胞-脂肪裂解物 200 µg
HMSC-hp L 人間充質(zhì)干細(xì)胞-肝臟裂解物 200 µg
HUMSCL 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞裂解物 200 µg
HPMSCL 人肺間充質(zhì)干細(xì)胞裂解物 200 µg
HMEpiCL 人乳腺上皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HMFL 人乳腺成纖維細(xì)胞裂解物 200 µg
HUVECL 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HUAECL 人臍動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞裂解物 200 µg
HUVSMCL 人臍靜脈平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HUASMCL 人臍動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞裂解物 200 µg
HBMEC cDNA 人腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBVSMC cDNA 人腦血管平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HBVP cDNA 人腦血管周細(xì)胞cDNA 20 reactions
HCPEC cDNA 人脈絡(luò)叢內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HCPEpiC cDNA 人脈絡(luò)叢上皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HCPF cDNA 人脈絡(luò)叢成纖維細(xì)胞cDNA 20 reactions
HMC cDNA 人腦膜細(xì)胞cDNA 20 reactions
HN cDNA 人神經(jīng)元cDNA 20 reactions
HCGC cDNA 人小腦顆粒細(xì)胞cDNA 20 reactions
HN-h cDNA 人海馬趾神經(jīng)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HOPC cDNA 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞cDNA 20 reactions
HOPC-os cDNA 人少突膠質(zhì)前體細(xì)胞(懸浮生長)cDNA 20 reactions
HSC cDNA 人雪旺細(xì)胞cDNA 20 reactions
HPC cDNA 人神經(jīng)束膜細(xì)胞cDNA 20 reactions
HA cDNA 人星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HA-c cDNA 人小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HA-sp cDNA 人脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HA-h cDNA 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HM cDNA 人小膠質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HDMEC cDNA 人微血管內(nèi)皮細(xì)胞cDNA 20 reactions
HDLEC cDNA 人血管平滑肌細(xì)胞cDNA 20 reactions
HEK cDNA 人表皮角質(zhì)細(xì)胞cDNA 20 reactions
HEK-a cDNA 人表皮角質(zhì)細(xì)胞-成人cDNA 20 reactions
HEM-l cDNA 人表皮黑色素細(xì)胞-淺色素cDNA 20 reactions
HEM-m cDNA 人表皮黑色素細(xì)胞-中色素cDNA 20 reactions
HEM-d cDNA 人表皮黑色素細(xì)胞-深色素cDNA 20 reactions人胚腎細(xì)胞
