亚洲精品日韩欧美精品,日韩欧美亚洲一区精选

上海邦景實業(yè)有限公司

主營產品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種

聯(lián)系電話

15000017673

您現(xiàn)在的位置：上海邦景實業(yè)有限公司>>分子生物學試劑>>核酸擴增>> Tuner(DE3)化學感受態(tài)細胞

產品分類品牌

公司信息

上海邦景實業(yè)有限公司

聯(lián)系人：: 劉小姐

電話：: 021-52960952

手機：: 15000017673

售后電話：: 15000017673

傳真：: 021-57690166

地址：: 上海市閔行區(qū)碧泉路36弄銀宵大廈

郵編：: 200000

網址：: www.bhsy-e.com/

商鋪：: http://www.kytsldc.cn/st582730/

給他留言

Tuner(DE3)化學感受態(tài)細胞

參考價	面議

參考價

面議

具體成交價以合同協(xié)議為準

型號
品牌 其他品牌
廠商性質 經銷商
所在地 上海市

在線詢價收藏產品加入對比

更新時間：2022-06-13 14:19:28瀏覽次數(shù)：187

聯(lián)系我們時請說明是環(huán)保在線上看到的信息，謝謝!

【簡單介紹】

編號	BJ-F0164681

Tuner(DE3)化學感受態(tài)細胞及公司其它各類產品：骨髓間充質干細胞HMSC-bm
IL12B Others Marmoset 狨猴 IL12B / IL-12B 細胞裂解液 (陽性對照)
非洲綠猴腎細胞系/IgRCD4-;VERO/IgRCD4-
NCI-H1650細胞，肺支氣管癌細胞小鼠前列腺癌細胞,RM-1細胞 CM-R031大鼠腸動脈內皮細胞*培養(yǎng)基100mL
Raji(Butt'

中文名稱：Tuner(DE3)化學感受態(tài)細胞
英文名稱：Tuner(DE3)Chemically Competent Cell
產品規(guī)格：10×100μl|50×100μl
發(fā)貨周期：1～3天
產品貨號：BJ-F0164681
生物醫(yī)學實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產品。產品介紹：

Tuner(DE3)菌株是BL21菌株的lacZY基因(半乳糖苷透性酶基因)突變株，此突變導致IPTG以均一速度進入體系中大腸桿菌的每個細胞，產生更加嚴格、均一的濃度依賴。

此菌株用于高效表達克隆于含有噬菌體T7啟動子的表達載體(如 pET系列)的基因。

λ噬菌體DE3區(qū)含有T7噬菌體RNA聚合酶，該區(qū)整合于Tuner的染色體上，所以稱為Tuner(DE3)，可同時表達T7 RNA聚合酶和大腸桿菌RNA聚合酶，可用于pET系列，pGEX，pMAL等質粒的蛋白表達。

Tuner(DE3)感受態(tài)細胞由特殊工藝制作，經pUC19質粒檢測轉化效率達107cfu/μg。

保存條件：-80℃

基因型：

F-ompT hsdSB(rB-mB-)gal dcm lacY1(DE3)

操作說明：

1.取100μl冰上融化的Tuner(DE3)感受態(tài)細胞，加入目的質粒并輕輕混勻，冰上靜置25分鐘。

2.42℃水浴熱激45秒，迅速放回冰上并靜置2分鐘，晃動會降低轉化效率。

3.向離心管中加入700μl不含抗生素的無菌培養(yǎng)基(2YT或LB)，混勻后37℃，200rpm復蘇60分鐘。

4.5000rpm離心一分鐘收菌，留取100μl左右上清輕輕吹打重懸菌塊并涂布到含相應抗生素的2YT或LB培養(yǎng)基上。

5.將平板倒置放于37℃培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)。

注意事項：

1.感受態(tài)細胞好在冰上融化。

2.混入質粒時應輕柔操作。

3.轉化高濃度的質?？上鄳獪p少終用于涂板的菌量。

4.誘導時，IPTG濃度可選(0.1-40mM均可)。

5.為獲得需要量的蛋白，佳誘導時間，溫度，IPTG濃度需實驗者優(yōu)化。

使用方法：本產品僅用于科研
注意：標本采集人員需按有關規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內將本產品分裝到自備的、螺旋蓋內有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內鼻腭處，停留片刻后緩慢轉動退出。以同一拭子拭兩側鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標本放入大小適合的塑料袋內密封；每袋裝一份標本。同時也將標本有關信息填在標本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內。
將裝標本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內，擰緊蓋，在容器上標明有關信息。同一患者2份以上的密封標本，可以放在同一個二級容器內。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內襯具吸水和緩沖能力的物質。所有容器必須印有生物危險標注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標本若不能在24小時內送達，則應盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。

注意事項：
①加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
⑧試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。