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上海邦景實業(yè)有限公司
主營產(chǎn)品： 進口elisa試劑盒，細胞株，細胞系，菌種 |
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- www.bhsy-e.com/
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- 所在地 上海市
更新時間：2022-06-10 11:54:29瀏覽次數(shù)：181
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操作規(guī)程
1、在96孔板加入細胞100μL/孔，通常細胞增殖實驗每孔加入100微升2000個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100微升5000～10000個細胞（具體每孔所用的細胞的數(shù)目，需根據(jù)細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定）。置37℃ 5%CO2細胞培養(yǎng)箱培養(yǎng)24小時.
2、.加入適當(dāng)濃度的0～10μL 受試化合物。
3、將96孔板在37℃，含5% CO2空氣及100%濕度的細胞培養(yǎng)箱中孵育適當(dāng)時間。
4、將5×MTT 用稀釋液稀釋成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液，在37℃孵育4小時，使MTT 還原為甲臜。
6、吸出上清液，每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解，用平板搖床搖勻。
7、酶標(biāo)儀在570nm 波長處檢測每孔的光密度（如無570nm 濾光片，可以使用560-600nm 的濾光片）。
8、結(jié)果分析
a、細胞的存活率：將各測試孔的OD 值減去本底OD 值（*培養(yǎng)基加MTT，無細胞）或空白藥物孔OD 值（*培養(yǎng)基加受試藥物的不同稀釋度加MTT，無細胞），各重復(fù)孔的OD 值取平均數(shù)±SD。細胞的存活率以T/C%表示，T 為加藥細胞的OD 值，C 為對照細胞的OD 值。細胞存活率% =（加藥細胞OD/對照細胞OD）×100
b、求出T/C = 50% 時的藥物濃度(IC50)及T/C = 10%時的藥物濃度(IC90)。
中文名稱：NF-κB熒光素酶報告基因質(zhì)粒
英文名稱：NFκB-luc Reporter gene plasmid
產(chǎn)品規(guī)格：1μg|100μg
發(fā)貨周期：1～3天
產(chǎn)品貨號：BJ-F0164495
生物醫(yī)學(xué)實驗中，常常需要從液體樣品(如血漿，培養(yǎng)基)中純化病毒，但由于病毒顆粒十分細小，傳統(tǒng)的分離方法是使用長時間超速離心才能將其從液體樣品中分離出來，此操作非常繁瑣，并且病毒在此過程中容易變性。為了克服傳統(tǒng)方法的缺點，本公司開發(fā)了本產(chǎn)品。
產(chǎn)品介紹：
NF-κB報告基因質(zhì)粒(pNFκB-luc)是用于檢測NFκB轉(zhuǎn)錄活性水平的報告基因質(zhì)粒。NF-κB質(zhì)粒是以pGL6質(zhì)粒為模板，在其多克隆位點插入了多個NFκB結(jié)合位點，可以高靈敏度地檢測NFκB的激活水平。 pGL6質(zhì)粒是用于在哺乳動物細胞中進行螢火蟲螢光素酶報告基因檢測的新一代質(zhì)粒。該報告基因質(zhì)粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改進，一方面對于luciferase的編碼進行了改進，確保能更好地在哺乳動物細胞中進行表達，同時對整個質(zhì)粒中所有可以被預(yù)測出的可能的轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合位點全部進行了適當(dāng)?shù)耐蛔兲幚?，在保持原有功能不變的情況下，使各種轉(zhuǎn)錄因子在質(zhì)粒上的非特異性結(jié)合降到低。 使用方法： 使用1μg包裝的本產(chǎn)品時，請先取少量本質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌，進行質(zhì)粒小量、中量或大量抽提后再用于后續(xù)用途。抽提獲得的質(zhì)粒可以通過酶切電泳進行鑒定，或通過測序進行鑒定。 100μg包裝的本產(chǎn)品質(zhì)粒濃度為0.1μg/μl，共1mL?？梢灾苯佑糜诿盖谢蛘咿D(zhuǎn)染細胞。 pNFκB-luc可以用常規(guī)的細胞轉(zhuǎn)染方法轉(zhuǎn)染細胞。檢測時可以采用的螢火蟲螢光素酶報告基因檢測試劑盒或雙螢光素酶報告基因檢測試劑盒。 TNF-α、IL-1β和LPS等是常見的可以激活NFκB的試劑，可以用作pNFκB-luc報告基因檢測時的陽性對照。 |
使用方法：本產(chǎn)品僅用于科研
注意：標(biāo)本采集人員需按有關(guān)規(guī)定做好個人防護。咽、鼻拭子最好在發(fā)病的3天采集。
在安全柜內(nèi)將本產(chǎn)品分裝到自備的、螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的5mL旋蓋塑料管里(一級容器)。
鼻拭子的采集：將棉簽輕輕插入鼻道內(nèi)鼻腭處，停留片刻后緩慢轉(zhuǎn)動退出。以同一拭子拭兩側(cè)鼻孔。將棉簽浸入上步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
咽拭子的采集：用棉簽擦拭雙側(cè)咽扁桃體及咽后壁，將棉簽浸入第一步得到的、裝有3mL本產(chǎn)品的旋蓋離心管中，棄去拭子尾部，擰緊螺旋蓋。
直接在一級容器上用油性記號筆寫明樣本的種類、采樣時間、編號、患者姓名。
將密閉后的標(biāo)本放入大小適合的塑料袋內(nèi)密封；每袋裝一份標(biāo)本。同時也將標(biāo)本有關(guān)信息填在標(biāo)本送檢表上，連同一級容器封于塑料袋內(nèi)。
將裝標(biāo)本的密封袋放入自備的帶螺旋蓋內(nèi)有橡膠圈的塑料容器(二級容器)內(nèi)，擰緊蓋，在容器上標(biāo)明有關(guān)信息。同一患者2份以上的密封標(biāo)本，可以放在同一個二級容器內(nèi)。二級容器要承受不少于95 KPa的壓力，內(nèi)襯具吸水和緩沖能力的物質(zhì)。所有容器必須印有生物危險標(biāo)注。
將二級容器擺放在專用運輸箱內(nèi)(或疫苗運輸箱)，放入冰排，然后以柔軟物質(zhì)填充，并密封，由專人(2人)運送，不得郵寄，最好使用專車。
采集的標(biāo)本若不能在24小時內(nèi)送達，則應(yīng)盡快在-70℃以下保存。無-70℃條件的，需在4℃冰箱短時間暫存，并盡快聯(lián)系遞送標(biāo)本。流感病毒在-20℃～-40℃時不穩(wěn)定，故長期保存最好在-70℃溫度以下進行。
CYP2B1蛋白表達ELISA定量檢測試劑盒
細胞β淀粉樣蛋白（βAMYLOID）蛋白表達流式細胞儀檢測試劑盒
載玻片細胞βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
冰凍切片組織βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
石蠟切片組織βAMYLOID蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)elisa ，英文名： ACE ELISA Kit
小鼠α1微球蛋白(α1-MG)ELISA檢測試劑盒Mouseα1-microglobulin,α1-MGELISAKit 96T/48T
人活性氧(ROS)免疫試劑盒 Human Reactive OXyen Species,ROS ELISA Kit
RatCollageypeⅡ,ColⅡELISAKit大鼠Ⅱ型膠原(ColⅡ)elisa規(guī)格：96T/48T
10倍細菌合成基礎(chǔ)培養(yǎng)液100毫升
MouseComplemefragme4a,C4aelisa小鼠過敏毒素/補體片斷4a(C4a)elisa規(guī)格：96T/48T
NF-κB熒光素酶報告基因質(zhì)粒小鼠氫化(HYD)elisa分析檢測試劑盒
小鼠氫/鉀離子交換ATP酶β肽(ATP4β)elisa檢測試劑盒
小鼠氫/鉀離子交換ATP酶α肽(ATP4α)elisa檢測試劑盒
小鼠輕肽鐵蛋白(FTL)elisa檢測試劑盒
小鼠輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)elisa檢測試劑盒
注意事項：
①加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。
②使用干凈的塑料容器配置洗滌液。
③按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
④底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。
⑤洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
⑥使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
⑦實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
⑧試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。
⑨不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
