補(bǔ)腎健脾，解毒利咽法對(duì)IgA腎病模型大鼠腎組織IgA1、TfR、TGF-β、IL-6影響的研究
觀察補(bǔ)腎健脾,解毒利咽法對(duì)IgA腎病模型大鼠腎組織中IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的含量變化的影響,從而更加深入的研究與探討,補(bǔ)腎健脾,解毒利咽法對(duì)于IgA腎病治療的療效作用與機(jī)理,為中醫(yī)中藥治療IgA腎病奠定理論基礎(chǔ)。方法:選取Wistar雄性大鼠80只,體重180±20g,購回后適應(yīng)性的喂養(yǎng)1周,用分層隨機(jī)的方法將大鼠分為空白組10只,造模組70只?？瞻捉M:從實(shí)驗(yàn)開始之日起,以4ml/kg蒸餾水灌胃隔日1次,共持續(xù)8周;皮下注射0.9%氯化納溶液0.4ml/只,每周1次,持續(xù)9周;于第6周尾靜脈注射0.9%氯化納溶液0.2ml/只。第10周起,給予4ml/（kg·d）生理鹽水灌喂,每日1次,持續(xù)12周末。造模組采取陸慧渝[1]等報(bào)道的方法,將牛血清白蛋白（BSA）結(jié)晶粉以蒸餾水配成100g/L濃度的稀釋液體,從實(shí)驗(yàn)開始之日,以4ml/kg灌胃隔日1次,共持續(xù)8周;將四氯化碳（CCL4）與蓖麻油,以1:3的比例混合均勻,以0.4ml/只皮下注射,每周1次,共持續(xù)9周;將脂多糖（LPS）以0.9%NaCl配成0.25g/L的溶液,于第6周每只尾靜脈注射0.2ml。第9周末隨機(jī)選取12只大鼠,其中造模組10只及空白組2只進(jìn)行驗(yàn)?zāi)?。觀察指標(biāo):（1）檢測(cè)各組大鼠24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及尿蛋白定量（UTP）;（2）檢測(cè)大鼠血清腎功能、肝功能的變化情況;（3）采用ELISA法和免疫組化法檢測(cè)腎組織中IgA1、轉(zhuǎn)鐵蛋白（TfR）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β（TGF-β）、白介素6（IL-6）含量變化及定位表達(dá);（4）應(yīng)用光鏡觀察各組大鼠腎組織病理形態(tài)學(xué)改變。結(jié)果:（1）實(shí)驗(yàn)過程中大鼠共死亡22只,其中驗(yàn)證模型處死12只大鼠,造模過程中死亡10只。（2）觀察空白組大鼠在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中一般狀態(tài)良好,無明顯異常狀態(tài)表現(xiàn);模型組大鼠給予四氯化碳皮下注射后表現(xiàn)為精神萎靡,腹瀉,尿液顏色加深,大鼠的毛發(fā)雜亂不光澤,大鼠口鼻、皮膚淺表處有血性分泌物,大鼠的體重也有明顯下降等表現(xiàn)。經(jīng)過治療23周后各治療組大鼠一般狀態(tài)好轉(zhuǎn),腹瀉癥狀減少,尿液顏色也較之前澄清,大鼠的體重較之前有所增加。（3）空白組中大鼠沒有出現(xiàn)血尿及蛋白尿癥狀,造模組中大鼠24小時(shí)RBC及24小時(shí)UTP有明顯升高,各治療組大鼠有所下降（P<0.05）,組間比較治療組與洛汀新對(duì)照組有明顯差異（P<0.05）。（4）空白組:大鼠腎組織內(nèi),除血管內(nèi)皮外,未見到IgA分子的沉積。造模組:大鼠腎組織內(nèi),可見明顯的IgA分子與熒光物質(zhì)結(jié)合形成的線狀或點(diǎn)狀的熒光亮點(diǎn),這些熒光物質(zhì)成線性排列。（5）IgA腎病模型大鼠腎組織內(nèi),可見明顯的IgA1、TfR、TGF-β、IL-6分子的沉積與空白組比較明顯升高。（6）各治療組大鼠經(jīng)治療后IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的水平明顯下調(diào)（P<0.05）,組間比較,補(bǔ)腎健脾,解毒利咽高、中低劑量組及洛汀新對(duì)照組比較有明顯差異（P<0.05）。（7）各組大鼠之間比較,腎功能及肝功能在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義上無差異（P>0.05）。結(jié)論:（1）實(shí)驗(yàn)過程中通過采用牛血清白蛋白灌胃及四氯化碳、脂多糖注射的方法,成功復(fù)制IgA腎病動(dòng)物模型。（2）補(bǔ)腎健脾,解毒利咽組能有效的降低24小時(shí)尿紅細(xì)胞計(jì)數(shù)及24小時(shí)尿蛋白排泄率;其中以中藥組療效優(yōu)于洛汀新組。（3）Ig A腎病模型大鼠腎組織中Ig A1、TfR、TGF-β、IL-6的水平與空白組比較顯升高,經(jīng)給藥治療后IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的水平有所下調(diào),與病情呈負(fù)相關(guān);說明IgA1、TfR、TGF-β、IL-6的異常表達(dá)參與了IgA腎病的發(fā)病,從而導(dǎo)致IgA腎病的發(fā)生。（4）各治療組比較,補(bǔ)腎健脾,解毒利咽方藥可能的機(jī)制可能與下調(diào)IgAN模型大鼠腎組織中IgA1、TfR、TGF-β、IL-6表達(dá)水平,來延緩IgAN的發(fā)生發(fā)展,減輕腎組織IgA沉積有關(guān)。
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