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如何正確操作使用355618BECKMAN超速離心管?

閱讀：121發(fā)布時(shí)間：2023-5-2

　　355618BECKMAN超速離心管的滅菌是用10%的過(guò)氧化氫浸泡，福爾馬林也適合所有的離心管但不全。70%的乙醇適用于PA和PP和PET管，水沸滅菌適合PA和PP管。環(huán)氧乙烷適合PC管。高溫高壓滅菌法，115℃、30min適合PA、PP和PC材料的離心管，但是PC材料的使用壽命將受限制；121℃、20min適合PA和PP管，126℃、15min均不適合任何離心管。此外，離心管在紫外下無(wú)法滅菌。

　　355618BECKMAN超速離心管操作中需要注意如下問(wèn)題：

　　(1)建議使用幼嫩的材料，材料含水量大時(shí)，可用70%乙醇擦拭，蒸餾水稍沖洗后用濾紙吸干，于液氮中研磨。如果材料量大(20g以上)，或所用的植物材料較老，或材料含有較多的酚類物質(zhì)，應(yīng)提高β-巰基乙醇的用量。

　　(2)氯仿抽提時(shí)，要保證抽提液中有一定的鹽濃度，否則DNA進(jìn)入沉淀。

　　(3)CTAB溶液在15℃以下會(huì)沉淀，因此離心和其他操作時(shí)不可在低溫下進(jìn)行。

　　(4)加入沉淀緩沖液應(yīng)在高于15℃的室溫下沉淀，如果室溫適宜，沉淀時(shí)間足夠而無(wú)沉淀出現(xiàn)，可能是鹽濃度高，這時(shí)可再加入沉淀緩沖液降低鹽濃度。離心收集CTAB沉淀緩沖液沉淀的DNA時(shí)，不能離心過(guò)度，高速度及長(zhǎng)時(shí)間的離心都會(huì)使沉淀過(guò)緊，而再溶解困難。

　　(5)采用真空抽干沉淀時(shí)，不能抽得太干抽得太干會(huì)使DNA斷裂，也可不采用真空抽干，將離心管置通風(fēng)柜或超凈工作臺(tái)中令乙醇自然蒸干，這樣對(duì)DNA造成的損傷小。

　　(6)10%的CTAB溶液很粘滯，取液時(shí)可將其加熱至56℃。

　　(7)轉(zhuǎn)移DNA溶液用的槍頭要剪去尖，避免對(duì)DNA的機(jī)械損傷。

　　(8)所得DNA應(yīng)為白色或灰白色，若呈褐色則有多酚物質(zhì)污染。對(duì)于含多酚類物質(zhì)多的材料，提取緩沖液中可加入1%的PVP。對(duì)于多糖含量高的材料，提取液中CTAB的濃度可增至3%或更高。

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