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固氮酶活性檢測—乙炔還原法

時間:2024-8-19閱讀:56
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生物固氮是自然生態(tài)系統(tǒng)利用氮素的主要途徑,固氮微生物利用體內(nèi)固氮酶,通過生物固氮作用(自生固氮、共生固氮或聯(lián)合固氮的形式)將大氣中的分子氮(N2)轉(zhuǎn)化成氨(NH3),參與氮素循環(huán)。

01固氮酶的檢測原理

固氮酶一般指鉬鐵固氮酶,即鐵蛋白(nifH編碼)和鉬鐵蛋白(nifDK編碼)構(gòu)成的雙組分蛋白酶;鐵蛋白負責(zé)傳遞電子給鉬鐵蛋白,N2和其他底物的結(jié)合還原在鉬鐵蛋白進行。

乙炔還原法的檢測原理是基于固氮酶的還原性,即指它可將與N2結(jié)構(gòu)相似的乙炔(C2H2)還原為乙烯(C2H4)。由此,C2H2可以被用作N2的替代底物,通過測定C2H4生成量來推算出固氮酶活性。

02固氮酶的應(yīng)用方向

固氮酶的應(yīng)用范圍廣泛,在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、生態(tài)保護、環(huán)境修復(fù)、科學(xué)研究和合成生物學(xué)等領(lǐng)域展現(xiàn)出巨大潛力。例如,固氮酶可以用于優(yōu)化施肥管理;評估土壤固氮能力;篩選和鑒定高固氮能力的菌株;研究品種選育和菌株固氮改良潛力;評估環(huán)境污染修復(fù)狀況等。


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