開花植物的有性受精產(chǎn)物（種子、谷物、水果等）提供了世界上大部分的食物和飼料供應。成功受精很大程度上取決于雄配子體的活性。

在自然條件下，大多數(shù)植物的花粉從花藥散出后只能存活幾小時或幾天?；ㄆ诓挥鼋o雜交工作造成困難，有的樹木和園林植物可通過延長花期解決，有的不得不進行花粉儲藏。

花粉冷凍保存是常見存儲方法，可以在較小的空間內(nèi)保存花粉，甚至是稀有和瀕臨滅絕的物種，并且可以根據(jù)需求將最佳花粉負載應用到柱頭上。

花粉冷凍保存過程通常包括一系列脫水、冷卻、儲存、解凍和再水化，可能會嚴重影響花粉質量，特別是在工藝條件不理想的情況下。因此，業(yè)界采用花粉活力測試作為風險管理工具，以防止由于授粉成功率不足而導致產(chǎn)量損失；另外確定花粉活力，為評估植物的繁殖潛力以及花粉細胞生物學基本問題的基礎研究提供了重要質控。

原理

TTC（2,3,5 - 三苯基氯化四氮唑）是一種氧化還原染料。具有活力的花粉在呼吸作用過程中會產(chǎn)生還原物質，這些還原物質能將無色的 TTC 還原成紅色的三苯甲臜。根據(jù)花粉被染成紅色的程度，可以判斷花粉的活力。有活力的花粉會被染成紅色，活力越高，顏色越深；而無活力的花粉則不會被染色或染色較淺。

操作步驟

花粉采集：選取發(fā)育良好、即將開放的花朵，用鑷子或毛筆輕輕收集花粉，盡量避免混入雜質。

花粉預處理：將采集到的花粉放入離心管中，加入適量的洗滌液，輕輕振蕩或攪拌，然后離心（一般轉速為 1000 - 2000 轉 / 分鐘，離心時間為 3 - 5 分鐘），棄去上清液，重復洗滌 2 - 3 次，以去除花粉表面的雜質。

染色：向經(jīng)過預處理的花粉中加入適量的 TTC 溶液和緩沖液，使花粉充分懸浮在溶液中。一般 TTC 溶液與緩沖液的體積比為 1:1 或根據(jù)試劑盒說明書進行配制。將混合液在黑暗條件下室溫孵育 15 - 30 分鐘，讓 TTC 與花粉充分反應。

觀察與計數(shù)：孵育結束后，取一滴染色后的花粉懸浮液滴在載玻片上，蓋上蓋玻片，在顯微鏡下觀察花粉的染色情況?？梢赃x擇多個視野進行觀察，并統(tǒng)計被染成紅色的花粉數(shù)量和未被染色的花粉數(shù)量，計算花粉活力百分比。花粉活力（%）=（紅色花粉數(shù) / 總花粉數(shù)）×100%。