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細(xì)胞因子elisa試劑盒的組成成分及應(yīng)用場(chǎng)景

閱讀:60      發(fā)布時(shí)間:2025-4-24
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  細(xì)胞因子elisa試劑盒是一種廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的分析工具,特別用于檢測(cè)細(xì)胞因子的濃度。細(xì)胞因子是細(xì)胞間信號(hào)傳遞分子,在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)和細(xì)胞增殖中起著至關(guān)重要的作用。
 

 

  ELISA的工作原理:
  1.固相化抗原:試劑盒中含有預(yù)涂有特定細(xì)胞因子抗體的微孔板,當(dāng)樣本加入板內(nèi)后,樣本中的細(xì)胞因子會(huì)與抗體結(jié)合。
  2.添加樣本:在孔內(nèi)添加待測(cè)樣本(如血清、細(xì)胞培養(yǎng)上清液等)后,細(xì)胞因子與固相化的抗體結(jié)合。
  3.洗滌:使用洗滌液去除未結(jié)合的物質(zhì),以減少非特異性結(jié)合。
  4.添加酶標(biāo)記二抗:向孔中加入酶標(biāo)記的二級(jí)抗體(針對(duì)細(xì)胞因子的抗體),該抗體會(huì)與結(jié)合的細(xì)胞因子形成三聚體。
  5.再洗滌:再次洗滌以去除未結(jié)合的二抗。
  6.底物反應(yīng):加入底物,酶與底物反應(yīng)生成可測(cè)量的信號(hào)(如變色),通過(guò)光密度(OD)值與標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行比對(duì),從而定量分析樣本中細(xì)胞因子的濃度。
  細(xì)胞因子ELISA試劑盒的主要成分:
  1.微孔板:預(yù)涂有特定抗體的孔,通常為96孔板,適合高通量實(shí)驗(yàn)。
  2.標(biāo)準(zhǔn)品:已知濃度的細(xì)胞因子標(biāo)準(zhǔn)品,用于建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。
  3.樣本緩沖液:用于稀釋樣本,確保樣本濃度適合實(shí)驗(yàn)要求。
  4.酶標(biāo)記二抗:特異性抗體,通常標(biāo)記有辣根過(guò)氧化物酶(HRP)或堿性磷酸酶(AP),用于與細(xì)胞因子結(jié)合。
  5.底物溶液:酶反應(yīng)所需的底物,不同的ELISA試劑盒使用不同的底物(如TMB、ABTS等)。
  6.洗滌液:用于洗滌微孔板,去除未結(jié)合的試劑。
  7.終止液:用于停止酶反應(yīng)的液體,常用硫酸或其他化學(xué)試劑。
  細(xì)胞因子elisa試劑盒的應(yīng)用領(lǐng)域:
  1.基礎(chǔ)研究:用于基礎(chǔ)生物學(xué)和醫(yī)學(xué)研究,例如炎癥、免疫、腫瘤等領(lǐng)域的細(xì)胞因子水平的檢測(cè)。
  2.臨床診斷:可以用于疾病監(jiān)測(cè)和診斷,如自身免疫病、感染性疾病、腫瘤等,幫助醫(yī)生評(píng)估疾病的嚴(yán)重程度和預(yù)后。
  3.藥物開(kāi)發(fā):在藥物篩選和療效評(píng)估中,細(xì)胞因子的水平常被用作生物標(biāo)志物。
  4.疫苗研發(fā):用于評(píng)估疫苗接種后的免疫反應(yīng),監(jiān)測(cè)細(xì)胞因子的變化。

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