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明膠酶譜實驗

時間：2016-1-7閱讀：1034
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明膠酶譜法被廣泛地用于明膠酶A(MMP-2)和明膠酶B(MMP-9）的測定，由于有活性的酶和無活性的酶原存在分子量的差別，明膠酶譜法可有效分離有活性的酶和無活性的酶原。而且能分離緊密結(jié)合在具有活性的酶上的內(nèi)源性組織抑制劑(TIMPs)。在此基礎(chǔ)上發(fā)展了反明膠酶譜法和原位明膠酶譜法等，分別用于測定明膠酶的抑制劑和細(xì)胞與組織中明膠酶的定位。

實驗材料細(xì)胞勻漿組織提取物

試劑、試劑盒聚丙烯酰胺凝膠明膠濃縮膠Tris-*緩沖液Triton X-100過硫酸銨甲醇醋酸考馬斯亮藍(lán)蛋白質(zhì)上樣緩沖液

儀器、耗材電泳糟凝膠成像儀

實驗步驟在整個測定過程中，要避免可抑制酶活性的成分污染；Triton X-100洗滌過程要充分，這對恢復(fù)酶的活性十分重要。如果要提高測定的靈敏度，可適當(dāng)增加孵育時間。

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